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荧光探针pcr试剂盒使用时这些事项可不能忽略

发布时间:2022-11-15      点击次数:35
  荧光探针pcr试剂盒利用吸附柱提取RNA作为模板,在反转录酶的作用下,以引物为起点合成与RNA模板互补的cDNA链;然后在DNA聚合酶的作用下,经高温变性、低温退火和中温延伸的多次循环,使特异DNA片段的拷贝数放大数百万倍。将扩增的DNA片段进行电泳、染色后,在紫外灯下,肉眼可见DNA片段的扩增带。
  荧光探针pcr试剂盒储存条件:
  1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
  2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
  3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
  5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
  荧光探针pcr试剂盒的注意事项:
  1.加入试剂的顺序应,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
  2.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
  3.按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
  4.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
  5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
  6.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
  7.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
  8.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
  9.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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