NADH氧化酶（NOX）测试盒关键注意事项

使用NADH氧化酶（NOX）测试盒时，需特别注意反应体系的稳定性。下是NADH氧化酶（NOX）测试盒使用时的关键注意事项，综合了不同检测方法的通用要点：

一、样本处理与保存

‌样本类型‌

组织样本需按1:5-10比例（g/mL）加入提取液，冰浴匀浆后4℃ 16,000 g离心20分钟取上清‌

细胞/细菌样本建议500万细胞/mL提取液，冰浴超声破碎（300 W，3秒间隔7秒，总3分钟）后离心‌

血清样本室温静置2小时或4℃过夜后离心，避免反复冻融‌

‌保存条件‌

上清液需立即检测或-80℃保存，避免反复冻融导致酶活性下降‌

二、试剂与仪器准备

‌试剂平衡‌

试剂盒使用前需室温平衡20分钟，浓缩洗涤液结晶需水浴溶解‌

检测溶液A/B需现配现用，避免长时间放置失效‌

‌仪器校准‌

移液器需定期校准（推荐0.5-10μL、20-200μL多规格）‌

酶标仪波长设置需匹配检测方法（如比色法540-550nm）‌

三、操作关键点

‌反应条件‌

37℃孵育时间需严格按说明书（如20分钟），温度波动需<±0.5℃‌

显色反应需避光（如Griess试剂法），5-20分钟内完成读数‌

‌干扰控制‌

避免使用含EDTA的样本缓冲液，可能抑制酶活性‌

标准品需梯度稀释，S0孔作为空白对照‌

四、数据解读

‌结果计算‌

样本稀释倍数需在最终结果中乘回（如说明书稀释5倍则结果×5）‌

超出线性范围需稀释后复测‌

‌质控要求‌

每批次实验需包含阳性/阴性对照‌

显色后60分钟内完成检测，避免颜色衰减‌