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咨询电话:18321818584ELISA试剂盒线性范围优化中常见的基质效应主要包括以下几类:
内源性物质干扰:样本中除目标分析物外的组分(如胆红素、血红蛋白、抗坏血酸等)可能干扰抗体与目标物的结合,导致信号抑制或偏差。
外源性物质干扰:来自实验环境或试剂的残留物(如塑料成分、缓冲液添加剂)可能影响检测特异性。
样本基质特性:样本的粘度、pH值或高浓度杂质蛋白(如肿瘤裂解物中的细胞碎片)会非特异性结合抗体,降低检测线性。
稀释非线性:未稀释样本中基质效应显著,稀释后干扰物浓度降低,但可能因目标物浓度同步稀释而影响线性关系。
优化建议:
通过加标回收实验验证基质效应(回收率80%-120%为佳)。
采用稀释样本、更换裂解缓冲液或使用基质稀释液(如含BSA的PBS)降低干扰。
选择高纯度标准品并优化洗板技术(如增加洗涤次数)以减少非特异性结合。
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