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高迁移率族蛋白1免费代测试剂盒实验原理
发布时间:2022-11-15      点击次数:62

高迁移率族蛋白1免费代测试剂盒说明书



检测范围:12.5pg/mL~400pg/mL

保存条件:2-8℃低温保存

保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。

试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。

选型:

产品规格:96T/48T

96T指可以做94个标本-2个标准对照-84个样本

48T指可以做47个标本-1个标准对照-42个样本主要成分:酶标板,试剂,标准品等。

试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。

检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..

高迁移率族蛋白1免费代测试剂盒试剂盒组成:

120 倍浓缩洗涤液30ml×1 瓶7终止液6ml×1 瓶

2酶标试剂6ml×1 瓶8标准品(270ng/L)0.5ml×1 瓶

3酶标包被板12 孔×8 条9标准品稀释液1.5ml×1 瓶

4样品稀释液6ml×1 瓶10说明书1 份

5显色剂 A 液6ml×1 瓶11封板膜2 张

6显色剂 B 液6ml×1/瓶12密封袋1 个

样本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2400 ng/L5 号标准品150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

1200ng/L4 号标准品150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

600ng/L 3 号标准品150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

300ng/L2 号标准品150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150ng/L1 号标准品150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

使用方法:

测定法的灵敏度来自作为报告的酶。,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。

1. 高迁移率族蛋白1免费代测试剂盒标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

 12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

 6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

 3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

 1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 

高迁移率族蛋白1免费代测试剂盒实验注意事项:

1、手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。

2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到的检测结果。

4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。

5、浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 

6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

7、所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

8、有效期:6个月。


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