E（IgE）ELISA试剂盒检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被E（IgE）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的E（IgE）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，E（IgE）ELISA试剂盒操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心0分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心0分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心0分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品
酶标仪（450nm）
高精度加样器及枪头：0.5-0uL、2-20uL、20-200uL、200-000uL
37℃恒温箱

操作注意事项
试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。
实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
预处理后的样本无需稀释，直接取50μL加样即可。
严格按照E（IgE）ELISA试剂盒说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
所有液体组分使用前充分摇匀。