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植物Elisa试剂盒的这些事项要牢记

发布时间:2022-11-15      点击次数:336
  植物Elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验,往预先包被植物磷脂酸捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物磷脂酸呈正相关,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,计算样品浓度。
  严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
  使用植物Elisa试剂盒时要注意以下事项。
  消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
  洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
  底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
  在储存和温育时避免强光直接照射。
  避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
  平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
  任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡5-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果,各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数量多,使用排枪加样。
  请每次测定的同时做标准曲线,好做复孔,如标本中待测物质含量过高,样本OD值大于标准品孔孔的OD值,请先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数。
  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
  所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
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