残留elisa试剂盒实验操作流程

残留elisa试剂盒操作流程如下：

（）待测样品孔中每孔加入待测样品00μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液00μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液00μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 00μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（0）每孔加TMB显色液 00μl，轻轻混匀0s，置37℃暗处反应5-20min。
（）每孔加00μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（2）分别测450nm 吸光值W和630nm吸光值W2，zui终测得的OD值为两者之差（W-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（3）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.为阳性判定标准。