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降钙素ELISA试剂盒测定样品中人降钙素原水平

发布时间:2022-11-15      点击次数:360
  降钙素ELISA试剂盒是一种由32个氨基酸组成的线性多肽激素,在人体内,主要由甲状腺的滤泡旁细胞(也称为C细胞)产生,在其他动物中,由末咽体产生,它的作用是降低血钙(Ca2+),抵抗甲状旁腺激素(PTH),在鱼类、爬行动物、鸟类和哺乳动物中发现了降钙素。
  降钙素是通过蛋白水解切割较大的前多肽原形成,该前多肽原是基因的产物,在功能上它是PTH和3的拮抗剂,高浓度的降钙素可能通过对肾小管的作用增加尿钙和磷酸盐的排泄,进而导致明显的低钙血症。在骨骼的保护中,降钙素避免钙动员过程中(如怀孕,尤其是哺乳期)骨骼钙流失,此外,降钙素抑制大鼠和猴子的摄食,可能具有调节摄食和食欲中枢神经系统的作用。
  每孔加入250μl检测缓冲液,室温孵育2小时,或者2 - 8°C封闭过夜,封闭后的酶标板可置于2-8°C贮存个星期,或者-20°C贮存2个月,封闭后的酶标板若要立即使用,请先洗涤两次,然后加入样本。撕掉封板膜、弃掉孔中液体,每孔加入约300μ的洗液,洗涤6次,每次洗完都要*移除孔中溶液,条件允许的话,加入洗液后300转/分钟振荡60秒,注意请勿接触酶标板的表面。每次洗涤,在吸水纸上拍干多余的洗液,洗板完成后请立即使用酶标板,或者颠倒置于湿的吸水纸上不得超过5分钟,不要让酶标板干燥。
  降钙素ELISA试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术,测定样品中人降钙素原水平,向预先包被了抗人降钙素原抗体的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入标记的抗降钙素原抗体,再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成黄色,在450 nm处测定反应孔样品吸光度值,样本中的人降钙素原浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线计算出样本中人降钙素原的浓度。
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