PCR扩增试剂盒特点:
1、基于phi29DNA聚合酶的高保真性、高合成率和链取代能力。
2、可以扩增基因组达上万倍,具有高产量和高保真性的特点。
3、可使用各种来源的样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞,真菌和病毒等。
4、操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
5、产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异,微卫星差异,SNP,STR)等。
6、本产品适用于纯化好的基因组DNA。
7、本产品只能用于科研。
PCR扩增试剂盒使用方法:
1、在PCR塑料管中加入9μLWGA溶液A,加入1μL纯化好的gDNA模板(DNA含量最好在10ng~100ng之间)。
2、在PCR仪器上95℃3分钟变性模板DNA。
注意:必须打开热盖。
3、冰上放置待用。
4、加入10μL2×WGA溶液B,轻柔吹打混匀。
5、加入1μLphi29DNA聚合酶(10U/μL),轻柔吹打混合均匀。
6、30℃保温10~12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30~50μL石蜡油以防水分蒸发,因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
7、65℃保温20分钟使phi29DNA聚合酶*灭活,然后-20℃长期放置或立即使用。
注:由于phi29DNA聚合酶有DNA外切活性,所以强烈推荐反应结束后65℃保温20分钟以将酶*灭活以免其干扰后续反应或长期保存时其降解DNA。