特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
产品名称 | 羊源性成分(Ovine)核酸检测试剂盒品牌 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间DL-高丝氨 250mL Glycine Buffer,0.2M,pH2.5 常温保存
3-(4-甲氧苯)丙 250mL Glycine Buffer,0.2M,pH3.0 常温保存
1-叔丁氧羰基-3-胺基环丁胺 250mL Glycine Buffer,0.2M,pH3.5 常温保存
二胺钠 100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH7.5 常温保存
甲酰亚胺胺一氢 100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.0 常温保存
苄酰 100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.5 常温保存
3-羟苯甲酯 100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH9.0 常温保存
2-苯乙基异酯 100mL GTE Buffer,pH8.0 常温保存
氯乙基异酯 500mL HCl Buffer,1.0M,pH6.5 常温保存
4-基酐 100mL HEPES Buffer,0.5M,pH6.5 常温保存
邻溴苄 100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.0 常温保存
4-氟-2-(三氟基)苯甲 100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.4 常温保存
2-基-3-甲氧苯胺 100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.5 常温保存
4-甲氧苯盐盐 100mL HEPES Buffer,0.5M,pH7.6 常温保存
4-溴啶盐盐 100mL HEPES Buffer,0.5M,pH8.0 常温保存
羊源性成分(Ovine)核酸检测试剂盒品牌TPthymidinephosphorylase) 人胸腺嘧啶核苷磷化酶 CAS: 62-31-7 规格: 200mg
PARP(Poly ADP ribose polymerase) 人多聚ADP核糖聚合酶 CAS: 130693-82-2 规格: 200mg
GCK(glucokinase) 人葡萄糖激酶 CAS: 122028-36-8 规格: 20mg
MAO(monoamine oxidase) 人单胺氧化酶 CAS: 77883-43-3 规格: 200mg
cPLA2(cytosolic phospholipase A2) 人胞浆型磷脂酶A2 CAS: 70918-74-0 规格: 20mg
DAO(diamine oxidase) 人二胺氧化酶 CAS: 28888-44-0 规格: 20mg
COX-2(cyclooxygenase-2) 人环加氧酶2 CAS: 23680-84-4 规格: 20mg
CDK5(Cyclin Dependent Kinase 5) 人周期素依赖性激酶5 CAS: 3663-80-7 规格: 20mg
KLK 10(Kallikrein 10) 人激肽释放酶10 CAS: 27631-29-4 规格: 20mg
PLC Gamma1(Phospholipase C Gamma1) 人磷酯酶Cγ链 CAS: 617677-53-9 规格: 15mg
NA(neuraminidase) 人神经氨酶 CAS: 1229-29-4 规格: 500mg
PIPLC(phosphoinositide-specific phospholipase C) 人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C CAS: 4504-87-4 规格: 50mg
PLC(Phospholipase C) 人磷酯酶C CAS: 4504-88-5 规格: 50mg
Tyk-2(tyrosine kinase2) 人酪氨激酶2 CAS: 4504-96-5 规格: 25mg
ICE(Interleukin 1 Beta converting enzyme) 人白介素1β转换酶 CAS: 25316-40-9 规格: 50mg