用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
产品名称 | 马源性成分(Horse)核酸检测试剂盒品牌 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。邻基乙 100mL MES Buffer,0.5M,pH8.0 常温保存
间氨苯甲 100mL MES Buffer,0.5M,pH8.5 常温保存
氨基乙缩二甲醇 100mL MES Buffer,0.5M,pH9.0 常温保存
N-乙氧羰基邻苯二甲酰亚胺 250mL MES Buffer,1.0M,pH5.0 常温保存
3-(三氟基)苯甲酰 250mL MES Buffer,1.0M,pH5.5 常温保存
2-溴-6-氟苯甲 250mL MES Buffer,1.0M,pH6.0 常温保存
3-三氟甲氧基溴苯 250mL MES Buffer,1.0M,pH6.5 常温保存
2-氯-5-甲氧基嘧啶 250mL MES Buffer,1.0M,pH7.0 常温保存
异异丙酯 250mL MES Buffer,1.0M,pH7.4 常温保存
三乙基硼氢化锂 250mL MES Buffer,1.0M,pH7.5 常温保存
1,3-二氟-5-苯 250mL MES Buffer,1.0M,pH8.0 常温保存
仲丁醇铝 250mL MES Buffer,1.0M,pH8.5 常温保存
5-基水杨酯 250mL MES Buffer,1.0M,pH9.0 常温保存
二氢双(2-甲氧乙氧基)铝钠 500mL MES Buffered Saline,5X,pH6.5 常温保存
2,3-二氢-1-苯并呋喃-5-基硼 500mL MES Buffered Saline,5X,pH7.0 常温保存
马源性成分(Horse)核酸检测试剂盒品牌E3/UBPL(E3/ubiquitin-protein ligase) 人泛素连接酶 CAS: 21704 规格: 125mg
MCT(mast cell tryptase) 人肥大细胞类胰蛋白酶 CAS: 4093-28-1 规格: 25mg
DT(dopachrome tautomerase) 人多巴色素异构酶 CAS: 77-67-8 规格: 500mg
E2/UBCE(E2/ubiquitin-conjugating enzyme) 人泛素结合酶 CAS: 86-35-1 规格: 200mg
PDI(protein disulfide isomerase) 人蛋白质二键异构酶 CAS: 452-35-7 规格: 200mg
CAD(caspase activated deoxyribonuclease0 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酶 CAS: 141-78-6 规格: 1.2ml×3ampules
Gamma-ECS(Gamma-glutamyl systeine synthetase) 人γ谷氨酰半胱氨合成酶 CAS: 规格: 1.5g
E1/UBAE(E1/ubiquitin-activating enzyme) 人泛素激活酶 CAS: 100-41-4 规格: 0.5ml×3ampules
PP(Pepsin) 人胃蛋白酶 CAS: 9004-57-3 规格: 1g
HK(Hexokinase) 人己糖激酶 CAS: 107-21-1 规格: 0.5ml
PDH E1(pyruvate dehydrogenase-E1) 人丙酮脱氢酶E1 CAS: 104-76-7 规格: 1.5ml
GSK(glycogen synthase kinase) 人糖原合成酶激酶 CAS: 88122-99-0 规格: 200mg
Casp-9(Caspase-9) 人胱天蛋白酶9 CAS: 26218-04-2 规格: 20mg
Casp-3(Caspase 3) 人胱天蛋白酶3 CAS: 规格: 20mg
NE(neutrophil elastase) 人中性粒细胞弹性蛋白酶 CAS: 乙基己基三酮相关物质C 规格: 20mg