产品名称:驴源性成分(Don)核酸检测试剂盒厂家
规格:48T/盒
类别:荧光-PCR法
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。
性能指标:点击了解更多荧光-PCR法。
1.试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。磷三钾(三水合物) 250ML MES Lysis Buffer with NP-40 常温保存
D(-)-对羟苯 125mL MES Lysis Buffer with NP-40,2X 常温保存
硝咪康唑 250ML MES Lysis Buffer with Triton 常温保存
Boc-D-缬氨 125ML MES Lysis Buffer with Triton,2X 常温保存
2-溴-5-甲氧苯甲 500mL MES SDS Running Buffer,20X 常温保存
二氢-3(2H)-呋喃酮 100mL Methylene Blue Stain,100x 常温保存
2,4-噻唑烷二酮 100mL MOBS Buffer,0.2M,pH7.0 常温保存
2-氯-5-硝基-4-基啶 100mL MOBS Buffer,0.2M,pH7.4 常温保存
2-氯-4-硝基啶 100mL MOBS Buffer,0.2M,pH8.0 常温保存
3-氯苯盐盐 100mL MOBS Buffer,0.2M,pH8.5 常温保存
6-三氟基烟 100mL MOPS Buffer,0.5M,pH5.5 常温保存
(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.0 常温保存
L-脯氨醇 100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.5 常温保存
(R)-(-)-1,2,3,4-四氢-1-萘胺 100mL MOPS Buffer,0.5M,pH7.0 常温保存
对三氟基乙 100mL MOPS Buffer,0.5M,pH7.4 常温保存
驴源性成分(Don)核酸检测试剂盒厂家CA-2(carbonic anhydrase 2) 人碳酐酶2 CAS: 109-94-4 规格: 1.2ml×3ampules
ADAM8(A Disintegrin And Metalloprotease 8) 人解整合素样金属蛋白酶8 CAS: 106-33-2 规格: 500mg
MPO(myeloperoxidase) 人髓过氧化物酶 CAS: 1110651 规格: 1g
Gzms-B(granzymes B) 人颗粒酶B CAS: 3198-07-0 规格: 200mg
Gzms-A(granzymes A) 人颗粒酶A CAS: 5308-25-8 规格: 0.5ml
CIAP(Calf intestinal alkaline phosphatase) 人牛小肠碱性磷酶 CAS: 120-47-8 规格: 200mg
SOD(Super Oxidase Dimutase) 人超氧化物歧化酶 CAS: 121-32-4 规格: 200mg
DPP IV (dipeptidyl peptldase IV ) 人二肽基肽酶Ⅳ CAS: 297-76-7 规格: 200mg
HD(Histone Deacetylase) 人组织蛋白去乙酰化酶 CAS: 7414-83-7 规格: 200mg
Methylase 人甲基化酶 CAS: 13517-23-2 规格: 300mg
TRACP-5b9tartrate-resistant acid phosphatase 5b) 人抗酒石性磷酶5b CAS: 25211-86-3 规格: 1g
PI3K(Phosphotylinosital 3 kinase) 人磷肌醇3激酶 CAS: 41340-25-4 规格: 400mg
PKB(protein kinase B) 人蛋白激酶B CAS: 96382-71-7 规格: 15mg
HO-2(heme oxygenase 2) 人血红素氧合酶2 CAS: 43210-67-9 规格: 100mg
M2-PK (Pyruvate Kinase) 人丙酮激酶M2型同工酶 CAS: 10605-21-7 规格: 30mg