常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
产品名称 | 肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒品牌 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。异丁烯 2 ug pOTB7 PPP2R5D 低温运输,-20℃保存
2,2,2-三乙醇 2 ug pAvu6-27 低温运输,-20℃保存
N-CBZ-L-天冬氨 2 ug pOTB7 SGTA 低温运输,-20℃保存
(R)-(+)-间硝苯缩水甘油酯 2 ug pOTB7 SGTB 低温运输,-20℃保存
青藤碱 2 ug pOTB7 STIP1 低温运输,-20℃保存
季戊四醇 2 ug pOTB7 STUB1 低温运输,-20℃保存
原丙三乙酯 2 ug pOTB7 STX1A 低温运输,-20℃保存
2-甲氧基丙烯 2 ug pOTB7 TOMM34 低温运输,-20℃保存
N-苄氧羰基-L-丙氨 2 ug pOTB7 TOMM70A 低温运输,-20℃保存
CBZ-L-酪氨 2 ug pPAmCherry-Tubulin 低温运输,-20℃保存
2-基丁 2 ug pPIC 3.5 低温运输,-20℃保存
Boc-L-苯氨醇 2 ug pPIC 3.5K 低温运输,-20℃保存
2-氨基蒽醌 2 ug pPIC 6A 低温运输,-20℃保存
9-beta-D-呋喃核苷鸟嘌呤 2 ug pPIC 6B 低温运输,-20℃保存
4-氯代苯酐 2 ug pPIC 6C 低温运输,-20℃保存
LFA-3/CD58(Mouse lymphocyte function associated antigen 3) 小鼠淋巴细胞功能相关抗原3 CAS: 规格: 25mg
sPECAM-1/sCD31(Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1) 小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1 CAS: 规格: 25mg
IL-17 大鼠白介素17 CAS: 125-84-8 规格: 200mg
GP(anti-glycoprotein antibody) 人抗糖蛋白抗体 CAS: 规格: 100mg
AMA(anti-Monocyte antibody) 人抗单核细胞抗体 CAS: 61-78-9 规格: 200mg
BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) 小鼠骨成型蛋白7 CAS: 24938-16-7 规格: 1.5g
IL-1sR I 大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ CAS: 591-27-5 规格: 300mg
HA(Mouse Hyaluronic acid) 小鼠透明质 CAS: 65-49-6 规格: 125mg
OLAb(oxidized lowdensity lipoprotein antibody) 人氧化低密度脂蛋白抗体 CAS: 3119-15-1 规格: 50mg
sE-selectin 大鼠可溶性E选择素 CAS: 2280-89-9 规格: 50mg
IL-1sR II 大鼠白介素1可溶性受体Ⅱ CAS: 19774-82-4 规格: 200mg
EJ/GlyRS(anti-EJ-antibody) 人EJ抗体/抗酰tRNA合成酶抗体 CAS: 51-26-4 规格: 20mg
GLP-1HA(Mouse ghcagons-like pepfide 1) 小鼠胰高血糖素样肽1 CAS: Amiodarone R... 规格: 25mg
CCK(Mouse Cholecystokinin) 小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽 CAS: 869-24-9 规格: 20mg
17-OHCS 大鼠17羟皮质类固醇 CAS: 33089-61-1 规格: 200mg
特点:
1. 肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒品牌即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。