常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
产品名称 | 狂犬病毒(RV)核酸检测试剂盒价格 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。苯基镁 1瓶 NTERA-2 低温运输和保存
9-蒽硼 1瓶 OCM-1A 低温运输和保存
2-溴-4-氟甲 1瓶 OKT 11 低温运输和保存
脱羧氯雷他定 1瓶 OK 低温运输和保存
嘧啶-5-甲 1瓶 OP9 低温运输和保存
2-乙基啶 1瓶 OS-RC-2 低温运输和保存
3-溴-4-氟甲 1瓶 OVCaR-3 低温运输和保存
四氢吡喃-2-甲醇 1瓶 P19 低温运输和保存
3,4-二氢-2H-吡喃-2-甲 1瓶 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 低温运输和保存
N-乙基吗啉 1瓶 P388D1(IL-L) 低温运输和保存
4-溴-3-硝苯甲醚 1瓶 P388D1 低温运输和保存
丙缩甘油 1瓶 P3-X63-Ag8.653 低温运输和保存
3-氟苄胺 1瓶 P3X63Ag8 低温运输和保存
间基甲醚 1瓶 P615 低温运输和保存
2-苯基啶 1瓶 P815 低温运输和保存
MIC-1 人巨噬细胞抑制因子-1 ELISA 试剂盒 进口/国产2-8℃,避光 规格:200mg
MCP-3/CCL7(monocyte chemotactic protein 3) 人单核细胞趋化蛋白3 进口/国产2-8℃,避光 规格:100mg
pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase) 小鼠磷化细胞外信号调节激酶 进口/国产2-8℃,避光 规格:100mg
CAM 大鼠钙调素 进口/国产2-8℃,避光 规格:100mg
CCB(Mouse calcium channel blockers) 小鼠钙通道阻滞剂 进口/国产2-8℃,避光 规格:100mg
Apo-E 大鼠载脂蛋白E 进口/国产2-8℃,避光 规格:200mg
MCP-2/CCL8(monocyte chemotactic protein 2) 人单核细胞趋化蛋白2 进口/国产2-8℃,避光 规格:200mg
MCP-1/CCL2/MCAF(monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor) 人单核细胞趋化蛋白1 进口/国产2-8℃,避光 规格:200mg
ALT/GPT(Mouse Alanine Aminotransferase) 小鼠丙氨转氨酶/谷丙转氨酶 进口/国产2-8℃,避光 规格:100mg
omentin 大鼠网膜素 进口/国产2-8℃,避光 规格:50mg
BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) 小鼠骨形成蛋白 进口/国产2-8℃,避光 规格:50mg
L-Selectin 人L选择素 进口/国产2-8℃,避光 规格:50mg
OFQ/N 大鼠孤腓肽 进口/国产2-8℃,避光 规格:50mg
PP 大鼠蛋白磷酶 进口/国产2-8℃,避光 规格:50mg
RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) 小鼠视黄醇结合蛋白4 进口/国产2-8℃,避光 规格:150mg
特点:
1. 狂犬病毒(RV)核酸检测试剂盒价格即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。