产品名称:高首鲟虹彩病毒PCR检测试剂盒价格
英文名称:White Sturgeon Iridovirus(WSIV)PCR
规格:详见说明书
类别:PCR检测试剂盒
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。
性能指标:点击了解更多PCR检测试剂盒。
1.试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。盐地尔卓 33286-22-5 20次
乙氧基胺盐盐 3332-29-4 12块 Instant SDS-PAGE Gel 4℃保存
三氟甲烷酯 333-27-7 30次 One-Stop SDS-PAGE Pack 丙烯酰胺溶液4℃保存,上样缓冲液需要-20℃保存,其余常温保存
2-氨基-6-氯吡 33332-28-4 500mL SDS-PAGE Stacking Gel Buffer 4℃保存
2-氨基-5-氯吡 33332-29-5 500mL SDS-PAGE Resolving Gel Buffer 4℃保存
1,12-二溴十二烷 3344-70-5 1mL SDS-PAGE Loading Buffer,5× -20℃保存
三氟甲锂 33454-82-9 10mL SDS-PAGE Loading Buffer,5× -20℃保存
BOC-1,4-丁二胺盐盐 33545-98-1 5L SDS-PAGE Running Buffer 常温保存
1-溴-2-丁炔 3355-28-0 20L SDS-PAGE Running Buffer 常温保存
6-溴-2-萘甲酯 33626-98-1 30次 One-Stop Stable SDS-PAGE Pack 4℃保存(上样缓冲液需要-20℃保存)
2-氨基-4-羟基啶 33631-05-9 30次 One-Stop Stable SDS-PAGE Pack 4℃保存(上样缓冲液需要-20℃保存)
噻唑-4-甲 3364-80-5 200mL Stable SDS-PAGE Gel Buffer 4℃保存
6-溴啶-2-甲醇 33674-96-3 10mL SDS-PAGE Reducing Agent 4℃保存
4-溴-2-硝苯甲醚 33696-00-3 1mL Stable SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
四丁基硼氢化铵 33725-74-5 20L Stable SDS-PAGE Running Buffer 常温保存
高首鲟虹彩病毒PCR检测试剂盒价格钨棒 规格: 0.1ml Ricinus communis agglutinin,RCA
化钨 规格: 0.1ml Lens culinaris agglutinin,LCA
三氧化钨 规格: 0.1ml Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA
氟化铈 规格: 0.1ml Hamster receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL
氧化铈 规格: 0.1ml Hamster matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA K
亚铈 规格: 0.2ml Hamster Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG
铈 规格: 0.1ml Hamster Cathepsin K,cath-K
二氧化钛 规格: 0.2ml Escherichia coli Protein,E.coli P
亚钛 规格: 0.2ml Soybean agglutinin,SBA
钛 规格: 0.2ml Rat 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu
碱式乙铝 规格: 0.2ml Rat 15-lipoxygenase,15-LO/LOX
油铝 规格: 0.2ml Rat 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS
硬脂铝 规格: 0.1ml Rat 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP
异丙醇铝 规格: 0.2ml Rat 17-ketosteroids,17-KS
粒 规格: 0.1ml Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3