常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
产品名称 | 猪轮状病毒A组(PRV-A)核酸检测试剂盒价格 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。4-基-3-硝苯甲酯 1993077 5g L-Ornithine 室温干燥避光保存
4-乙炔苯甲醚 768-60-5 100g OX Bile Powder 室温保存
4-氯-2-氟硝苯 700-37-8 10g Oxytetracycline HCl 室温干燥避光保存
4-氯苯基氯甲酯 7693-45-0 50g D-Pantothenic Acid Hemicalcium Salt 4℃避光保存
4-哌啶甲酯 7462-86-4 5g Papain 4℃保存
4-羟基-2-硝苯甲 74230-08-3 25g Paraformaldehyde 密封干燥保存
4-羟苯硼 71597-85-8 1g PDA(1,4-Bis(acryloyl)piperazine) 常温干燥避光保存
4-三氟基环己烷-1-酮 75091-99-5 100mg Pectinase( Aspergillus Niger) 4℃保存
4-溴-2-甲氧苯酚 7368-78-7 100mg Pectolyase Y-23 密封干燥保存
4-溴苯乙胺 73918-56-6 25g Pectin 室温干燥保存
5-氨基乳清 7164-43-4 250g PEG12000 室温保存
5-氟乳清 703-95-7 250g PEG20000 室温保存
5-氯-2-基基哌 76835-20-6 250g PEG 3350 室温阴凉干燥保存
5-氯-2-基甲 2045146 250g PEG 4000 室温阴凉干燥保存
5-氯噻吩-2-甲 7283-96-7 250g PEG6000 室温阴凉干燥保存
PRL Poultry PRL 禽类酶联免疫ELISA试剂盒 进口/国产常温,避光 规格:50mg
E2 鱼雌二醇 进口/国产常温,避光 规格:50mg
Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA 小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体 进口/国产常温,避光 规格:100mg
BRAK/CXCL14(Breast and kidney expressed chemokine,BRAK) 人胸肾表达趋化因子 进口/国产常温,避光 规格:100mg
(BAX)Rat Bcl-2 associated X protein,Bax 大鼠Bcl-2相关X蛋白 进口/国产常温,避光 规格:30mg
TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) 兔子肿瘤坏死因子α 进口/国产常温,避光 规格:100mg
Mouse phosphatidylserine,PS 小鼠磷脂酰丝氨 进口/国产常温,避光 规格:50mg
TGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) 兔子转化生长因子β 进口/国产常温,避光 规格:100mg
ACTH 鱼促肾上腺皮质激素 进口/国产常温,避光 规格:100mg
sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ) 大鼠可溶性凋亡相关因子 进口/国产2-8℃,避光 规格:100mg
BLC-1/CXCL13(B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1) 人B-淋巴细胞趋化因子 进口/国产常温,避光 规格:100mg
CTAP III (connective tissue-activating peptide III ,CTAP III ) 人结缔组织活化肽Ⅲ 进口/国产常温,避光 规格:50mg
Annexin A2 c 人膜粘连蛋白 Ⅱ ELISA 试剂盒 进口/国产常温,避光 规格:100mg
Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG 小鼠胆碱磷甘油酯 进口/国产常温,避光 规格:100mg
ChAT (Rat Choline Acetyltransferase ) 大鼠胆碱乙酰转移酶 进口/国产常温,避光 规格:100mg
特点:
1. 猪轮状病毒A组(PRV-A)核酸检测试剂盒价格即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。