使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。产品名称:桃拉综合症病毒PCR检测试剂盒厂家
英文名称:Taura Syndrome Virus(TSV)PCR
规格:详见说明书
类别:PCR检测试剂盒
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。
性能指标:点击了解更多PCR检测试剂盒。
1.试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。Veronal Buffered Saline with EDTA (VBSE) 英文名(EN):8-Hydroxyquinoline (≥99%, crystalline)CAS No.:148-24-3规格(SP):25G类别(Key):通用试剂
Veronal Buffered Saline with EDTA (VBSE) 英文名(EN):6-Hydroxydopamine (≥97%, 6-OHDA)CAS No.:28094-15-7规格(SP):100MG类别(Key):通用试剂
Veronal Buffered Saline with Mg++ and Ca++ (VBS++) 英文名(EN):Hemin (BioXtra, from Porcine, ≥98.0%)CAS No.:16009-13-5规格(SP):1G类别(Key):通用试剂
Veronal Buffered Saline with Mg++ and Ca++ (VBS++) 英文名(EN):HAT Media Supplement (50×) Hybri-MaxCAS No.:Null规格(SP):1VL类别(Key):通用试剂
Veronal Buffered Saline with Mg++ and EGTA (VBSMG) 英文名(EN):Guanidine thiocyanate (≥97.0%)CAS No.:593-84-0规格(SP):25G类别(Key):通用试剂
Veronal Buffered Saline with Mg++ and EGTA (VBSMG) 英文名(EN):Guanidine thiocyanate (for molecular b...CAS No.:593-84-0规格(SP):25G类别(Key):通用试剂
Wash Buffer 英文名(EN):Guanidine hydrochloride (≥99.0%)CAS No.:18264规格(SP):100G类别(Key):通用试剂
Wash Buffer,pH8.0 英文名(EN):Guanidine hydrochloride (for molecular...CAS No.:18264规格(SP):100G类别(Key):通用试剂
Yeast Lysis Buffer (for large scale prep) 英文名(EN):Gum arabic from acacia treeCAS No.:2593228规格(SP):100G类别(Key):通用试剂
Yeast Lysis Buffer (for mini prep) 英文名(EN):Glycerol (ACS reagent, ≥99.5%)CAS No.:56-81-5规格(SP):100ML类别(Key):通用试剂
Yeast Lysis Solution for DNA Isolation 英文名(EN):Glycerol (cell culture tested, ≥99%)CAS No.:56-81-5规格(SP):100ML类别(Key):通用试剂
Zinc Acetate Solution(乙酸锌溶液),100mM 英文名(EN):Glycerol (for molecular biology, ≥99%)CAS No.:56-81-5规格(SP):100ML类别(Key):通用试剂
Zinc Chloride Solution(氯化锌溶液),25mM 英文名(EN):β-Glycerophosphate disodium (BioUltra...CAS No.:154804-51-0规格(SP):10G类别(Key):通用试剂
Zinc Sulfate Solution(硫酸锌溶液),100mM 英文名(EN):Glutaraldehyde solution (Grade I, 50% ...CAS No.:111-30-8规格(SP):10ML类别(Key):通用试剂
Zinc-Fixative 英文名(EN):Glutaraldehyde solution (Grade I, 25% ...CAS No.:111-30-8规格(SP):100ML类别(Key):通用试剂
Zinc-Formalin 英文名(EN):Glass beads, acid-washed (425-600 μm)CAS No.:Null规格(SP):10G类别(Key):通用试剂
Zymogram Developing Buffer,10X 英文名(EN):Solid-glass beads (borosilicate, diam....CAS No.:Null规格(SP):100G类别(Key):通用试剂
Zymogram Renaturation Buffer,10X 英文名(EN):Solid-glass beads (borosilicate, diam....CAS No.:Null规格(SP):100G类别(Key):通用试剂
桃拉综合症病毒PCR检测试剂盒厂家亚甲基蓝 规格:200mg Trihexyphenidyl Hydrochloride
四溴兰 规格:200mg Dimenhydrinate
伊文斯蓝 规格:200mg Tetrahydrozoline Hydrochloride
硝基氯化四氮唑蓝 规格:500mg Thiotepa
氯化硝基四氮唑蓝 规格:200mg Thiethylperazine Malate
靛蓝胭脂红 规格:200mg Prednisolone Acetate
百里蓝 规格:50mg Trimipramine Maleate
百里蓝 规格:25mg Clonazepam Related Compound C
溴蓝 规格:200mg Dehydroacetic Acid
溴蓝 规格:30mg Apigenin
苯蓝(水溶) 规格:15mg
甲苯蓝O 规格:100mg Norethindrone Acetate
甲苯蓝 规格:200mg Carbachol
溴百里香蓝 规格:200mg Carteolol Hydrochloride
溴百里蓝盐 规格:100mg Mefloquine Hydrochloride