常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
产品名称 | 鸭瘟病毒(DPV)核酸检测试剂盒价格 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。3-呋喃甲醇 4412-91-3 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
2-基并咪唑 4414-88-4 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
1,3,5-苯三甲酰 4422-95-1 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
乙基硼 4433-63-0 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
甲硝唑 443-48-1 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
1-O-基-3,5-二-O-[(2,4-二氯苯基)基]-alpha-D-赤式戊呋喃糖苷-2-酮 443642-30-6 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
5-氟靛红 443-69-6 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
2-氯-6-氟甲苯 443-83-4 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
2,6-二氟苯 443-88-9 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
2-氟-6-基胺 443-89-0 200 mL Cell Separation Solution -20℃保存
2,3-二氢-1,4-苯并二烷-6-羧 4442-54-0 100mL Lymphocyte Separation Solution A 4℃保存
5-溴-2-氯三氟甲苯 445-01-2 100mL Penicillin-Streptomycin Solution -20℃保存
2-氨基-5-氯三氟甲苯 445-03-4 100mL Percoll 常温保存
邻氟苯甲 445-29-4 100mL
(甲基)乙乙酯 4455-13-4 100mL Ficoll-Paque 常温保存
龙胆紫血液琼脂基础 规格: 0.1ml Rat soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1
十二基琼脂 规格: 0.1ml Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1
改良罗氏培养基基础 规格: 0.1ml Rat soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL
性L-G培养基基础 规格: 0.1ml Rat Clara cell protein,CC16
碱性L-G培养基基础 规格: 0.1ml Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF
戊脒多粘菌素B琼脂基础 规格: 0.1ml Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF
琼脂基础 规格: 0.1ml Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3
指示选择性培养基基础 规格: 0.2ml Rat lymphotactin,Lptn/LTN
PLET琼脂基础 规格: 1ml Rat lymphocyte factor
MiddleBrook 7H10琼脂 规格: 0.1ml Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC
MiddleBrook 7H11琼脂 规格: 0.1ml Rat phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα
气单胞菌鉴别琼脂 规格: 0.1ml Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK
精氨肉汤 规格: 0.1ml Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK
曲素琼脂基础 规格: 0.1ml Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase
假单胞分离琼脂 规格: 0.2ml Rat Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K
特点:
1. 鸭瘟病毒(DPV)核酸检测试剂盒价格即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。