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PCR试剂盒

产品名称: PCR试剂盒
更新时间: 2019-07-09
产品型号:
产品特点: PCR试剂盒是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。

PCR试剂盒 的详细介绍

产品名称:PCR试剂盒
规格:48T/盒
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。
性能指标:点击了解更多荧光-PCR法
1.试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月

使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
乙氧甲酰基亚乙基三苯基膦 5717-37-3 10U ATP Sulfurylase -20℃保存

4-甲苯硼 1395356 1000U E. coli DNA Ligase -20℃保存

2-甲氧苯硼 1395388 200U T4 DNA Ligase -20℃保存

4-甲氧苯硼 5720-07-0 1000U T5 DNA Ligase -21℃保存

2,3,4,6-四乙酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物 572-09-8 1000U Taq DNA Ligase -20℃保存

1-叔丁氧羰基哌 57260-71-6 2500U 9°N  DNA  Ligase -20℃保存

3-氯-2-啶甲 57266-69-0 1000U T4 RNA Ligase -20℃保存

2-溴蒽醌 572-83-8 1000U T4 RNA Ligase 1 -20℃保存

N-BOC-GAMMA-氨基丁 57294-38-9 150U T4 RNA Ligase 2 -20℃保存

9-溴菲 573-17-1 2000U T4 RNA Ligase 2(truncated) -20℃保存

戊巴比妥钠 57-33-0 2000U T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q) -20℃保存

2-氨基-4-氯-6-甲氧基嘧啶 5734-64-5 200U ATP Dependent DNase -20℃保存

5-氯-2-氟苯 57381-34-7 100mg DNase I Powder 4℃或-20℃保存

2-溴-5-氟苯 57381-39-2 1.5mL DNase I Solution 4℃(短期)或-20℃(长期)保存

PCR试剂盒肉浸液琼脂  规格: 0.1ml  Rat Insulin Receptor β,ISR-β

Hugh-Leifson培养基  规格: 0.1ml  Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1

西蒙氏柠檬盐培养基  规格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2

克氏柠檬盐培养基  规格: 0.1ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1

亚铁琼脂  规格: 0.5ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2

乳糖胆盐发酵管培养基  规格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3

乳糖发酵管培养基  规格: 0.2ml  Rat Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4

乳糖复发酵管培养基  规格: 0.2ml  Rat Proinsulin,PI

煌绿琼脂  规格: 0.1ml  Rat insulin autoantibodies,IAA

煌绿增菌液  规格: 0.1ml  Rat islet cell antibody,ICA  

GN增菌液  规格: 0.1ml  Rat Amylin

完全培养基  规格: 0.1ml  Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1

WS琼脂  规格: 0.1ml  Rat alcohol dehydrogenase,ADH

5%纯度乳糖发酵管  规格: 0.2ml  Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH

Honda氏产毒肉汤基础  规格: 0.1ml  Rat acetylcholine,ACH 

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