影响国产ELISA试剂盒结果干扰因素有哪些

国产ELISA试剂盒实验测定中，存在众多的干扰因素及影响实验结果的判断，这给实验者在一定程度上带来了的困扰，今天小编在这里为大家分析下ELISA实验过程中内源性的干扰因素。内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清(浆)标本中，有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质，从而导致测定结果的假阳性。

类风湿因子(rheumatoid factors,RF)在类风湿患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有较高或不同浓度的RF，RF一般为TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因为在elisa测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。尤其是在捕获法IgM型特异抗体的测定中表现zui为明显，因为此时固相包被的抗体为抗人弘链抗体，IgM型RF的存在可使其大量结合于固相。为避免RF对ELISA测定的干扰，通常可以采取下述措施：

、稀释标本：这在判断急性病原体感染的特异IgM抗体如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM抗体检验等尤为有用。因为急性感染时，血循环中特异的IgM抗体滴度通常很高，而RF滴度通常相对要低得多。因此，在测定前对标本进行稀释，特异的IgM因高滴度存在仍可检出，而非特异的RF则会因为稀释变成非常低的滴度，从而对测定几乎不产生干扰。现在，有些特异IgM检测elisa试剂盒不要求稀释标本，直接检测，这样虽然方便了实验室技术人员的操作，但容易出现假阳性结果，并且由于某些慢性感染，如HBV的感染，血循环中抗HBelgM可持续以一定的滴度存在，标本不做稀释即进行检测，即可出现阳性结果，从而失去抗HBclgM用于HBV急性感染的诊断价值。因此，在临床实验室，一定要使用要求对标本做:000稀释的试剂盒进行检验，从而保证相应检测项目结果的可靠性及临床应用价值。

2、改变酶标抗体：由于RF结合的是IgG的Fc片段，如果将待酶标的抗体的F，片段酶切夫除，仅留下具有特异结合功能的F(ab’)2部分标记酶，则在测定中即可避免RF的干扰。

3、标本中RF用变性IgG预先封闭：将经热变性(63℃，0min)的动物如兔、羊等的IgG加入到标本稀释液中，或是将该变性IgG连接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后加入临床血清标本，反应后，再吸出标本进行检测。此外，在测定特异IgM时，也可使用抗人IgG去除临床标本中RF和IgG。

4、国产ELISA试剂盒测定抗原时，可在标本中加入可使RF降解的还原剂：如2—巯基乙醇。2—巯基乙醇等还原剂可使抗体内的巯基裂解，因而可以去除RF的干扰，但只适用于抗原测定。

5、包被或酶标二抗使用特异的鸡抗体IgY：RF不与鸡IgY反应，如果包被和酶标二抗均为鸡IgY抗体，则不受标本中RF的干扰。
含量测定    含量：    进口/国产        20mg/支    英文名称    075-2006    规格:
含量测定    含量：    进口/国产    靛蓝    20mg/支    英文名称    076-20060    规格:
含量测定    含量：    进口/国产        20mg/支    英文名称    077-200204    规格:
含量测定    含量：    进口/国产    酯蟾毒配基    20mg/支    英文名称    078-200507    规格:
含量测定    含量：    进口/国产    麝香酮    20mg/支    英文名称    079-20052    规格:
含量测定    含量：    进口/国产        20mg/支    英文名称    072-2004    规格:
含量测定    含量：    进口/国产    柚皮苷    20mg/支    英文名称    0722-20060    规格:
含量测定    含量：    进口/国产    甘草次酸    20mg/支    英文名称    0723-20062    规格:
国产ELISA试剂盒