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咨询电话:18321818584 关于减少血清沉淀的问题,要减少血清中的沉淀物,需要从制备、储存和使用环节进行优化。以下是具体方法和原理:
核心方法就是:规范解冻、避免反复冻融、减少物理应力和谨慎热灭活。下面我具体说说怎么做:
一、规范解冻步骤
2-8℃缓慢解冻:把血清从-20℃冰箱取出后,先放2-8℃冰箱12-24小时,再室温完全溶解。
轻柔摇匀:解冻过程中每隔一段时间轻轻摇晃,让温度和成分均匀。
避免高温解冻:千万别直接放37℃水浴或室温,温差太大会让蛋白质析出。
二、避免反复冻融
分装保存:解冻后分装到无菌离心管,避免反复冻融。
储存温度:长期保存要放在-20℃或更低,温度波动会降低蛋白质溶解度。
三、减少物理应力
轻柔操作:移液时避免产生气泡,别剧烈摇晃或震荡。
离心处理:如果已经有沉淀,可以400g离心5分钟取上清,但别过滤,容易堵膜。
四、谨慎热灭活
非必要不灭活:热灭活(56℃ 30分钟)容易让蛋白质变性,增加沉淀。
必须灭活时:要边灭活边摇晃,保持均匀。
五、其他注意事项
避免长时间高温:别把血清放37℃太久,会变浑浊。
区分沉淀和污染:纤维蛋白沉淀是絮状,磷酸钙是小黑点,别和霉菌或细菌搞混。
总之,按这些方法操作,能有效减少沉淀,不影响血清品质。
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