细胞裂解液

简要描述：售后:我公司具有优质的技术团队细胞裂解液一旦售出,产品仅用于科研实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。

产品型号：GY-L1500B
厂商性质：科研
更新时间：2025-11-26 13:36:54
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细胞裂解液

规格：100ml

英文名:Cell lysis buffer

英文别名:Cell lysis buffe;Cell Lysis Solution

中文名:细胞裂解液

中文别名:细胞裂解液主要组成

细胞裂解液的主要成分为Tris、EDTA、蔗糖,如果实验需要,需另行自备PMSF等蛋白酶抑制剂。裂解蛋白产物,可以用生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。

细胞裂解液使用方法

1.培养细胞
(1)取出细胞裂解液,待融化后,颠倒混匀数次,可适量分装冻存。如果实验需要,按比例加入PMSF(使其最终浓度为1mM)或其他蛋白酶抑制剂,混匀,立即使用。
(2)贴壁细胞,去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰,也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞数秒后细胞就会被裂解。
(3)悬浮细胞,收集培养细胞,离心去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗2-3遍(如血清中的蛋白没有干扰,也可以不洗),用手指把细胞用力弹散,按6孔板每孔细胞加入100-200微升的比例加入裂解液。如果细胞数量较大,应按50-100万细胞/管分装或根据细胞数量按比例增加裂解液。用手指轻弹管底以促进裂解液和细胞充分接触,裂解完全时应无明显的细胞颗粒Chemicalbook。
(4)裂解物经10,000-14,000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(5)裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
2.组织样品
取Ep管,分别称重标记,把组织剪切成小块装入Ep管中,称重。按每20毫克组织加100-200微升的比例加入裂解液(如裂解不完全,可以适当增加裂解液的用量;如需要的蛋白样品浓度较高,可以适当减少裂解液的用量)。用手握式电动组织细胞匀浆器匀浆约1分钟或直至充分裂解。10,000-14,000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。如果组织样品本身非常细小,如淋巴细胞,可直接加入裂解液裂解,通过振荡(Vortex)以使样品裂解完全。

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