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酶联ELISA试剂盒的结构组成及具体的操作步骤

发布时间:2024-01-15      点击次数:62

  酶联免疫吸附试验是一种常用的免疫学实验技术,用于检测和测定样本中特定抗原或抗体的存在。酶联ELISA试剂盒是用于进行ELISA实验的一种专门配制的试剂盒,包括各种必需的试剂和材料,方便实验者进行ELISA实验。原理是基于抗原与抗体之间的特异性结合反应。首先,在微孔板上固定抗原或抗体,然后加入待测样品,样品中的抗体或抗原与固定的抗原或抗体发生特异性结合。接着加入酶标记的二抗,与待测样品中的抗体或抗原结合后形成复合物。经过洗涤去除非特异性结合物质后,加入底物液,酶与底物发生反应,产生可定量测定的颜色信号。最后加入停止液终止反应,用酶标仪测定吸光度,根据标准曲线计算出待测样品中抗原或抗体的浓度。

  酶联ELISA试剂盒.jpeg

  酶联ELISA试剂盒的组成:

  

  1.微孔板:用于固定抗原或抗体,并用于加入样本和试剂的反应。

  

  2.标准品:包括一系列已知浓度的标准品,用于建立标准曲线,以便测定未知样品中的抗原或抗体浓度。

  

  3.抗原或抗体:用于固定在微孔板上,与待测样品中的抗体或抗原发生特异性反应。

  

  4.酶标记的二抗:用于检测待测样品中的抗体或抗原结合后的信号。

  

  5.底物液:用于与酶标记的二抗发生反应,产生可定量测定的颜色信号。

  

  6.停止液:用于终止底物液的反应,停止颜色的变化。

  

  7.洗涤缓冲液:用于洗涤微孔板,去除非特异性结合物质。

  

  操作步骤:

  

  1.准备样品和试剂:将待测样品和试剂室温平衡,标准品需要按照说明书稀释到不同浓度。

  

  2.固定抗原或抗体:将微孔板加入固定抗原或抗体的溶液,孵育一段时间后,倒出液体,用洗涤缓冲液洗涤。

  

  3.加入标准品和样品:在微孔板中加入标准品和待测样品,孵育一段时间后,倒出液体,用洗涤缓冲液洗涤。

  

  4.加入酶标记的二抗:在微孔板中加入酶标记的二抗,孵育一段时间后,倒出液体,用洗涤缓冲液洗涤。

  

  5.加入底物液:在微孔板中加入底物液,孵育一段时间后,加入停止液终止反应。

  

  6.测定吸光度:用酶标仪测定吸光度,根据标准曲线计算出待测样品中抗原或抗体的浓度。

  

  酶联ELISA试剂盒广泛应用于医学、生物学、农业、食品安全等领域,用于检测和测定血清中的病毒、细菌、激素、抗体等物质,也可用于检测食品中的残留农药、重金属等有害物质。在医学领域,可用于诊断传染病、肿瘤标志物、自身免疫性疾病等。在生物学研究中,可用于研究蛋白质相互作用、细胞信号转导、免疫学反应等。

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