大鼠肝窦内皮细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝窦内皮细胞（SEC）是肝脏内所占比例最高的非实质细胞，位于肝窦腔与肝细胞之间，具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时，肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起，其过程极复杂，在多种肝病的发病前期阶段均有出现，近年来受到广泛关注。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠肝窦内皮细胞
组织来源 肝脏组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 大鼠肝窦内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠肝窦内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠肝窦内皮细胞经CD31或CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠肝窦内皮细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
门静脉插管、灌流泵、IV 型胶原酶、无钙灌流液、含钙消化液、Percoll 分离液、离心管。
二、取材与预处理
大鼠麻醉固定，开腹暴露门静脉，穿刺插管固定，剪断下腔静脉作为流出道。
预热灌流液准备体外肝脏原位灌流。
三、细胞分离与消化
第一步无钙灌流冲净肝脏内血液；第二步胶原酶循环灌流消化肝脏实质。
取下肝脏撕碎，培养基吹打制成粗细胞悬液，滤网过滤。
Percoll 密度梯度离心分层分离肝窦内皮细胞组分。
四、纯化与接种培养
吸取目标细胞层，离心洗涤去除分离液。
专用培养基接种铺板，37℃培养。
4h 换液去除枯否细胞、肝细胞等杂细胞，短期原代使用。
