大鼠骨髓单个核细胞分离自腿骨髓组织；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单个核细胞是骨髓中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是（mononuclear cell）单个核细胞，而不是（Monocyte）单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与骨髓其他细胞不同，利用一定比例聚蔗糖和泛影酸钠形成的等渗溶液作密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，可将各种血细胞与单个核细胞分离。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠骨髓单个核细胞
简称 BMMC
组织来源 腿骨髓组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
培养基： 大鼠骨髓单个核细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 半贴壁半悬浮
细胞形态： 圆形
传代比例： 不传代
传代特性： 不增殖；不传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠骨髓单个核细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠骨髓单个核细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠骨髓单个核细胞采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
1. 器械：骨髓穿刺针、手术剪、镊子、15mL 离心管、200 目滤网
2. 试剂：PBS、淋巴细胞分离液（大鼠专用）、α-MEM 基础培养基、双抗
3. 预处理：器械高压灭菌，操作台紫外消毒 30min
二、取材与预处理
1. 大鼠处死后 75% 酒精浸泡，剥离股骨、胫骨，剪去两端骨骺暴露骨髓腔
2. 无菌 PBS 冲洗骨髓腔，反复吹打冲出全部骨髓内容物，制成骨髓悬液
三、细胞分离与消化
1. 骨髓悬液轻柔叠加于等量淋巴细胞分离液上层，保持液面清晰分层
2. 水平离心机 800g 离心 20min，设置慢升慢降程序
3. 离心后液体分为四层，吸取中间白膜层即为单个核细胞
四、纯化与接种培养
1. 吸取白膜层细胞，加入 PBS 稀释，1000r/min 离心 8min 洗涤 2 次
2. 去除上清，基础培养基重悬细胞，计数调整细胞浓度
3. 根据实验需求直接铺板培养或后续诱导分化处理
