大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）分离自腿骨髓组织；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化，因此可以作为组织工程中的种子细胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核细胞总数的0.001%-0.1%，含量极低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高，在培养过程中，受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠骨髓间充质干细胞
简称 BMSCs;MSCs
组织来源 腿骨髓组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
培养基： 大鼠骨髓间充质干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠骨髓间充质干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠骨髓间充质干细胞经CD90或CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠骨髓间充质干细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
1. 灭菌解剖工具、70μm 细胞筛、15mL 离心管；配制含 10% FBS + 双抗的 α-MEM 完全培养基
2. 0.25% 胰酶、PBS 缓冲液；SPF 级 SD 大鼠（3~5 周）
二、取材与预处理
1. 大鼠脱臼处死，75% 乙醇浸泡 5min 消毒后分离双侧股骨、胫骨
2. 剪掉骨头两端骨骺，5mL 注射器吸取预冷 PBS，从骨髓腔一端冲入，收集骨髓冲洗液
三、细胞分离与消化
1. 骨髓悬液充分吹打混匀，70μm 筛网过滤，去除骨渣组织
2. 滤液 1200rpm 离心 6min，弃上清，PBS 重悬洗涤一次
3. 本方法常规提取无需胶原酶消化，若骨髓组织结块可短暂胰酶轻消化 1min 终止
四、纯化与接种培养
1. 离心沉淀用完全培养基重悬，接种于 T25 培养瓶
2. 培养 24h 后彻底更换培养基，弃去悬浮造血细胞，后续每 3d 换液
3. 细胞长至 85% 汇合度，胰酶消化传代，P3 代细胞可用于后续实验
