大鼠晶状体上皮细胞分离自晶状体组织;晶状体源自胚胎发育外胚层,仅含有上皮细胞及其产物,晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞完全分开;因而,晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰,又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染,保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡,包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中,晶状体上皮细胞分化和成熟,然后迁移到晶状体内部,产生晶体蛋白,自身也拉长而变成晶状体纤维细胞,并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明,晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控,包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形,呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞,其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关,体外培养是研究其生长规律的主要手段。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠晶状体上皮细胞
简称 LECs
组织来源 晶状体组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 大鼠晶状体上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠晶状体上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠晶状体上皮细胞经BFSP2(晶状体蛋白)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠晶状体上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
显微眼科器械、培养皿、离心管;DMEM 基础培养基、0.25% 胰酶、PBS、双抗。
大鼠麻醉处死相关用品,超净台紫外消毒。
二、取材与预处理
摘取大鼠完整眼球,无菌 PBS 冲洗眼周血迹。
显微镜下剪开眼球后囊,挤出完整透明晶状体,剥离晶状体表面虹膜色素组织。
三、细胞分离与消化
晶状体囊膜朝外,放入胰酶溶液 37℃消化 10min。
轻柔吹打囊膜内侧,使晶状体上皮细胞脱落释放。
加入胎牛血清终止胰酶消化,充分吹打混匀悬液。
四、纯化与接种培养
细胞悬液低速离心 5min,弃上清,培养基重悬沉淀。
接种至培养瓶,37℃恒温培养。
次日换液去除晶状体纤维组织碎屑,后续常规传代培养。
