大鼠口腔黏膜成纤维细胞分离自口腔黏膜组织；口腔（oral cavity）是消化道的起始部分。前借口裂与外界相通，后经咽峡与咽相续。口腔内有牙、舌等器官。口腔的前壁为唇、侧壁为颊、顶为腭、口腔底为黏膜和肌等结构。口腔借上、下牙弓分为前外侧部的口腔前庭（oral vestibule）和后内侧部的固有口腔（oral cavity proper）；当上、下颌牙咬合时，口腔前庭与固有口腔之间可借第三磨牙后方的间隙相通。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠口腔黏膜成纤维细胞
组织来源 口腔黏膜组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
培养基： 大鼠口腔黏膜成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠口腔黏膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠口腔黏膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠口腔黏膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
组织剪、弯镊、培养皿；MEM 培养基、0.25% 胰酶、PBS、双抗。
所有耗材高压灭菌，操作台紫外消毒。
二、取材与预处理
大鼠口腔消毒，剪取颊侧口腔黏膜组织，PBS 冲洗表面唾液与污物。
显微器械剔除黏膜上层上皮组织，保留下方真皮结缔组织。
PBS 反复漂洗组织块，剪碎至细小组织粒。
三、细胞分离与消化
组织碎块加入胰酶 37℃消化 30min，每隔 10min 吹打打散组织。
血清终止消化，收集全部细胞与组织混合悬液。
静置去除大块未消化组织，吸取中层细胞悬液。
四、纯化与接种培养
滤网过滤杂质，离心收集细胞沉淀，洗涤重悬。
接种培养瓶，贴壁生长即为成纤维细胞。
24h 首次换液，后续每 2~3 天更换完全培养基。
