大鼠皮层神经元细胞分离自大脑皮质组织；皮层神经元细胞是构成中枢神经系统结构和功能的基本单位。神经元是具有长突触（轴突）的细胞，它由细胞体和细胞突起构成。在长的轴突上套有一层鞘，组成神经纤维，它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中，细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。细胞体是细胞含核的部分，其形状大小有很大差别，直径约4-120微米。核大而圆，位于细胞中央，染色质少，核仁明显。细胞质内有斑块状的核外染色质，还有许多神经元纤维。细胞突起是由细胞体延伸出来的细长部分，又可分为树突和轴突。每个神经元可以有一或多个树突，可以接受刺激并将兴奋传入细胞体。每个神经元只有一个轴突，可以把兴奋从胞体传送到另一个神经元或其他组织，如肌肉或腺体。皮质神经元是大脑皮质的主要组成细胞之一，是大脑进行功能活动调节的基本单位，参与动物多种中枢神经系统疾病的病理过程。通过形态学观察显示神经元从贴壁、伸出突起开始；突起逐渐增多，而后突起进一步增多并逐渐成网，同时细胞胞体增大，周边光晕明显。10-12 d细胞最为丰满，随后神经元开始裂解，突起逐渐减少，细胞已退化变性，轮廓模糊，光晕消失，细胞变形。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠皮层神经元细胞
组织来源 大脑皮质组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 大鼠皮层神经元细胞完全培养基(含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 神经元细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液： 0.125%胰蛋白酶
大鼠皮层神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠皮层神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠皮层神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备（提前 1 天）
用多聚赖氨酸（PDL）包被培养板 / 瓶，过夜；次日无菌水漂洗 3 次，晾干备用。
器械高压灭菌，预冷 HBSS/PBS、Neurobasal+B27 完全培养基，水浴预热 37℃。
取材选择：孕鼠 E17–E18 胚胎 或 出生 24h 内乳鼠。
二、取材与解剖（全程冰上无菌操作）
孕鼠麻醉 / 处死后取出子宫，剥离胚胎；乳鼠直接断头，75% 乙醇消毒头部。
剪开颅骨取出完整大脑，置于预冷 HBSS。
分离双侧大脑皮层，彻底撕掉脑膜与血管（关键，否则胶质污染重），弃小脑、海马、中脑。
预冷 PBS 漂洗皮层 2–3 次。
三、组织消化制单细胞悬液
用剪刀把皮层剪碎成约 1mm³ 小组织块，转入离心管。
加 0.25% 胰酶（或木瓜蛋白酶），37℃水浴消化12–15 min，中途轻晃几次。
加含血清培养基终止消化，巴氏管轻柔吹打组织块至无肉眼可见碎块。
经 70μm 细胞筛过滤，去除残留组织团。
1200 rpm 离心 5 min，弃上清。
四、接种培养
沉淀用神经元完全培养基（Neurobasal +2% B27 + 谷氨酰胺 + 双抗）重悬，计数。
按目标密度接种到 PDL 包被板，放37℃、5% CO₂培养箱静置。
接种 48h 后首次半量换液，之后每 2–3 天半量换液（勿全换，避免应激死亡）。
若需高纯度神经元：接种后可加阿糖胞苷抑制胶质细胞增殖，24h 后换液洗去药物。
五、后续常用节点
培养7 天左右神经元成熟、突触网络发达，适合给药、造模、电生理、免疫荧光。
