大鼠脐动脉平滑肌细胞分离自脐带组织；它是脐动脉的重要结构组成细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构，脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO₂和O₂，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘，脐静脉将O₂和营养物质从胎盘运送给胎儿。由于脐带是分娩过程中的废弃物，同时从脐带中分离脐静动平滑肌细胞方法相对成熟，使得体外培养的脐动脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠脐动脉平滑肌细胞
组织来源 脐带组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
培养基： 大鼠脐动脉平滑肌细胞完全培养基(基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠脐动脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠脐动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠脐动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来。
操作步骤 operation steps
无菌分离胎鼠脐动脉，预冷 PBS 清洗血管内外血迹，纵向剖开血管段充分展平管壁。
无菌棉签用力反复刮除内侧全部内皮细胞，彻底消除内皮细胞混杂污染。
刮净内膜后的血管中膜组织剪碎成细小组织块，均匀贴放于培养瓶底。
37℃培养箱倒置静置 24h 使组织贴壁牢固，补加平滑肌细胞专用培养基正置培养。
间隔 3d 半量换液，镜下观察梭形平滑肌细胞从组织块向外迁移生长。
待细胞铺满瓶底 85% 左右使用胰酶消化传代，利用差速贴壁进一步纯化细胞。
采用 α-SMA 免疫荧光鉴定平滑肌纯度，可用于收缩、迁移、增殖相关实验。
