大鼠脐静脉平滑肌细胞分离自脐带组织；它是脐静脉的重要结构组成细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构，脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO₂和O₂，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘，脐静脉将O₂和营养物质从胎盘运送给胎儿。血管平滑肌是许多重大血管疾病的细胞基础；血管平滑肌细胞的异常增加的生长潜力在血管疾病发生过程中起决定作用。由于脐带是分娩过程中的废弃物，同时从脐带中分离人脐静脉平滑肌细胞方法相对成熟，使得体外培养的脐静脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠脐静脉平滑肌细胞
组织来源 脐带组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
培养基： 大鼠脐静脉平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠脐静脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠脐静脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠脐静脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来。
操作步骤 operation steps
实验准备：提前配制血管平滑肌专用完全培养基，无菌包被培养板，预热无菌PBS、0.25%胰酶消化液，准备无菌显微解剖器械，选用新生SD大鼠脐静脉组织。
无菌取材：无菌条件下剥离大鼠完整脐静脉，剔除外围脂肪、结缔组织及血管外膜，PBS反复漂洗去除残留血液与杂质。
组织处理：纵向剪开脐静脉，刮除血管内皮细胞，将纯净血管中膜组织剪切成1mm³均匀细小组织块。
酶解消化：加入复合消化液（胰酶+胶原酶II），37℃恒温消化20min，每5min轻柔震荡一次，促进组织充分解离。
纯化离心：加入含血清完全培养基终止消化，70μm细胞筛过滤去除组织残渣，1200rpm离心5min，弃上清收集细胞沉淀。
接种培养：专用培养基轻柔重悬细胞沉淀，调整细胞密度，接种于包被好的培养板，置于37℃、5%CO₂恒温培养箱静置培养。
常规养护：接种24h后首次换液，去除未贴壁杂细胞，后续每2天全量换液，细胞汇合至85%可传代或开展实验。
