大鼠胰岛细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%,每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规治疗产生的严重低血糖症状,具有创伤小及并发症少等优点,是最有前景的Ⅰ型糖尿病治疗方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤,分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠胰岛细胞
组织来源 胰腺组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
培养基: 大鼠胰岛细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠胰岛细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠胰岛细胞经DTZ染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠胰岛细胞采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来。
操作步骤 operation steps
大鼠腹腔麻醉后开腹,胆总管逆行注射胶原酶消化液,结扎胆总管末端防止消化液外流。
取下膨胀胰腺置于 37℃水浴振荡消化 15min,终止消化后反复洗涤胰腺组织碎片。
通过 Ficoll 密度梯度离心法分层分离胰岛,弃去下层胰腺外分泌细胞组分。
显微镜下筛选形态圆润、边界清晰的胰岛团块,转移至悬浮培养瓶培养。
每 2 天更换胰岛培养液,观察胰岛完整性,破损胰岛及时丢弃防止释放蛋白酶损伤健康胰岛。
可开展葡萄糖耐受、药物降糖相关检测,无需解离成单细胞,保留胰岛三维结构。
如需长期留存,采用胰岛慢冻程序冻存,复苏后优先检测胰岛素与胰高血糖素整体分泌水平。
