大鼠支气管成纤维细胞分离自支气管组织；支气管（Bronchi），是指由气管分出的各级分枝，由气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是，气管是以“C”型的气管软骨为支架，而支气管不是。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的支气管成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。支气管成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠支气管成纤维细胞
组织来源 支气管组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
培养基： 大鼠支气管成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠支气管成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠支气管成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠支气管成纤维细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来。
操作步骤 operation steps
无菌取出大鼠气管与细小支气管，剥离支气管外侧结缔组织，去除气道上皮。
组织剪碎后贴壁培养，等待支气管周围成纤维细胞向外迁移爬出。
培养第 6 天首次换液，去除气道上皮脱落碎片，保留梭形成纤维细胞。
细胞汇合度达到 85% 进行胰酶消化传代，纯化上皮杂细胞。
可用 TGF-β 刺激诱导上皮间质转化、气道纤维化模型，检测纤连蛋白表达。
传代过程注意控制密度，低密度接种会显著降低支气管成纤维增殖速率。
冻存细胞可长期用于哮喘、慢阻肺气道重塑相关药理筛选实验。
