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鸡肺动脉内皮细胞

鸡肺动脉内皮细胞

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产品概述 product description

鸡肺动脉内皮细胞分离自肺大动脉组织;肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中,把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺动脉起于右心室,在主动脉之前向左上后方斜行。细胞呈单层多角形铺路石状分布;该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。肺动脉内皮细胞呈单层多角形铺路石状分布,该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。

产品属性 product attributes

产品名称 鸡肺动脉内皮细胞

组织来源 肺大动脉组织

默认种属 三黄鸡,其他咨询
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)

培养基: 鸡肺动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 内皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传2-3代

消化液: 0.25%胰蛋白酶

鸡肺动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测 quality test

实验室分离的鸡肺动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介 method

实验室分离的鸡肺动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

操作步骤 operation steps

一、实验前准备

1. 试剂:M199 培养基、15% 鸡胚血清、双抗、0.1%Ⅰ 型胶原酶、肝素 PBS。

2. 耗材:血管结扎线、显微剪镊、培养瓶、离心管,选用成年肉鸡肺动脉。

3. 无菌环境取材,器械提前高压灭菌。

二、取材与预处理

1. 鸡处死后开胸,分离心肺组织,游离肺动脉主干及分支,剔除外周结缔组织。

2. 两端结扎血管一端,肝素 PBS 反复冲洗血管内腔,彻底冲净血液。

3. 外壁酒精消毒,沥干管内冲洗液备用。

三、细胞分离与消化

1. 血管内灌注胶原酶消化液,封口结扎,37℃水浴消化 18~22min。

2. 剪开管口收集消化液,培养基冲洗血管内壁,合并所有细胞悬液。

3. 离心收集细胞沉淀,PBS 洗涤去除消化酶。

四、纯化与接种培养

1. 内皮专用完全培养基重悬接种培养瓶,置于培养箱贴壁生长。

2. 24h 换液去除悬浮杂质细胞,后续隔日更换培养基。

3. vWF 因子染色鉴定内皮纯度,细胞汇合后低比例传代,避免内皮细胞间质转化。