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双肾上腺皮质激素样激酶3(DCLK3)重组蛋白(Mouse,小鼠)

简要描述:双肾上腺皮质激素样激酶3(DCLK3)重组蛋白(Mouse,小鼠)缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

  • 产品型号:GOY-01D2614
  • 厂商性质:科研
  • 更新时间:2023-10-24 00:00:00
  • 访  问  量:111

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详细介绍

18.jpg

产品名称:双肾上腺皮质激素样激酶3(DCLK3)重组蛋白(Mouse,小鼠)

物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名称:Recombinant Doublecortin Like Kinase 3 (DCLK3)

DCAMKL3; DCDC3C; Doublecortin And CaM Kinase-Like 3; Doublecortin domain-containing protein 3C; Serine/threonine-protein kinase DCLK3

型号:GOY-01D2614

20.jpg

物种

Mus musculus (Mouse,小鼠)

来源

原核表达

宿主

E.coli

亚细胞定位

分泌

预测分子量

21.4kDa

实际分子量

21kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签

Asp635~Ser790 with N-terminal His Tag

缓冲液成份

磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM  DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性状

冻干粉

纯度

> 90%

内毒素水平

<1.0EU/μg(LAL法测定)

等电点

4.8

应用

Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格

10μg50μg200μg1mg5mg

 

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21.jpg

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1. 双肾上腺皮质激素样激酶3(DCLK3)重组蛋白(Mouse,小鼠)在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

2.  每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;

3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;

4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;

2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

19.jpg

5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;

6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法)

7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融

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