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KYSE-150 (人食管鳞癌细胞)

简要描述:KYSE-150 (人食管鳞癌细胞)生长培养基 RPMI-1640+Ham's F-12+10% FBS+1%P/S 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

  • 产品型号:GOY-01X0624 
  • 厂商性质:科研
  • 更新时间:2023-10-24 00:00:00
  • 访  问  量:82

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产品名称

规格

货号

KYSE-150 (人食管鳞癌细胞)

1×10⁶/T25培养瓶

GOY-01X0624

商品详情:

名称KYSE-150 (食管鳞癌细胞) (STR鉴定正确)

别称 KYSE 150; KYSE150; Kyse150; KY150

种属 人类

年龄(性别) 女性,49岁

组织来源 食管

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 Established from the poorly differentiated esophageal squamous cell carcinoma resected from upper (cervical) esophagus of a 49-year-old Japanese woman after receiving radiotherapy (tumor was invading contiguous structures); described as carrying amplified oncogenes, c-erb-B (8x) and cyclin D1 (4x) and producing tumors in nude mice.

生物安全等级 1

生长培养基 RPMI-1640+Ham's F-12+10% FBS+1%P/S

推荐传代比例 1:4-1:8

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~13.7小时 (PubMed=1728357); 23小时 (PubMed=25984343);

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%;CO2,5%

温度:37℃

致瘤性 Yes, in nude mice

7.png
细胞培养步骤:

一、KYSE-150 (人食管鳞癌细胞)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

a)、 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。

三、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃

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