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M-07e(人巨细胞白血病细胞)

简要描述:M-07e(人巨细胞白血病细胞)注意事项该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。

  • 产品型号:GOY-01X0665 
  • 厂商性质:科研
  • 更新时间:2023-10-24 00:00:00
  • 访  问  量:104

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产品名称

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货号

M-07e(人巨细胞白血病细胞)

1×10⁶/T25培养瓶

GOY-01X0665

商品详情:

名称M-07e (人巨细胞白血病细胞) (STR鉴定正确)

别称 M-07E; M-O7e; M07-e; M07e; Mo7e; MO7e; M07E; MO7E

种属 人类

生长特性 悬浮细胞

细胞形态 淋巴母细胞样

生长培养基 RPMI-1640+10% FBS+8ng/mL GM-CSF+1% P/S

冻存条件 

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件 

气相:空气,95%;CO2,5%

温度:37℃

推荐传代比例 5×10^5-1×10^6cells/mL

推荐换液频率 2~3次/周

注意事项 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。

背景描述 Established from the peripheral blood of a 6-month-old girl with acute megakaryoblastic leukemia (AML M7) at diagnosis in 1987; subline of the growth factor-independent cell line M-07; M-07e cells respond proliferatively to GM-CSF, IFN-alpha, IFN-beta, IFN-gamma, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-15, NGF, SCF, TNF-alpha, TPO; we have noted that the cell line can become very quickly cytokine-independent (within 3-4 weeks), presumably due to outgrowth of independent cells. Exome and RNA sequence data are available

年龄(性别) 女性,6个月

组织来源 外周血

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 白血病细胞

生物安全等级 1

倍增时间 ~40小时

抗原表达情况 CD3 -, CD13 +, CD14 -, CD19 -, CD33 +, HLA-DR -

7.png
细胞培养步骤:

一、M-07e(人巨细胞白血病细胞)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

a)、 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。

三、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;

4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃

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