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谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒可见分光光度法
50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨
酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储
存和运输形式。
测定原理
GS 在 ATP 和 Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为 γ─
谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下形成的络合物在 540nm 处有最大吸收峰,可用分光光度
计测定。
所需的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸
馏水。
试剂的组成和配制
提取液:30mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:12mL×1 瓶,-20℃保存,临用前 37℃预热 20min,充分混匀,如有沉淀,静置 10min,
取上清待用。
试剂二:12mL×1 瓶,-20℃保存,临用前 37℃预热 20min,充分混匀,如有沉淀,静置 10min,
取上清待用。
试剂三:粉剂×2 瓶, -20℃保存。用时每瓶加入 5mL 蒸馏水充分溶解待用。
试剂四:15mL×1 瓶,4℃保存。
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