人子宫成纤维细胞分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征：①是子宫的重要细胞组成，在体外易于培养；②在子宫损伤后能修复和重塑子宫；③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。
产品属性 product attributes
产品名称 人子宫成纤维细胞
组织来源 子宫组织
默认种属 人，其他咨询
培养基： 人子宫成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
人子宫成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的人子宫成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人子宫成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来。
操作步骤 operation steps
取出细胞培养瓶，显微镜观察细胞汇合度达 80‑85%，吸弃旧培养基。
加入无菌 PBS 清洗细胞 2 次，轻柔晃动培养瓶，吸除 PBS。
加入适量 0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液，覆盖细胞贴壁面，37℃孵育 2‑4min，镜下观察细胞回缩变圆。
加入等量完全培养基终止胰酶消化，反复轻柔吹打瓶壁，制备单细胞悬液。
将细胞悬液转移至离心管，1000r/min 离心 5min，弃上层上清液。
加入专用完全培养基重悬细胞沉淀，按比例分瓶接种到新培养瓶。
置于 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱培养，24h 后观察贴壁状态，按需换液。
