小鼠脑动脉血管平滑肌细胞分离自脑动脉组织；脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环；静脉系多不与同名动脉拌行，所收集的静脉血先进入静脉窦再汇入颈内静脉；各级静脉都没有瓣膜。它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性 product attributes
产品名称 小鼠脑动脉血管平滑肌细胞
组织来源 脑动脉组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
培养基： 小鼠脑动脉血管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠脑动脉血管平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的小鼠脑动脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的小鼠脑动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来。
操作步骤 operation steps
复苏准备：脑动脉血管平滑肌细胞完全培养基、PBS 缓冲液、0.25% 胰蛋白酶‑EDTA 消化液放 37℃水浴回温，超净台紫外灭菌 30min，准备 T25 培养瓶、15mL 离心管、无菌枪头耗材，核对冻存管编号，确认无破损漏液。
水浴快速解冻：从液氮罐取出细胞冻存管，浸入 37℃温水，轻柔摇晃冻存管，1‑2min，大部分冰晶融化，留少量冰屑即可取出，75% 酒精擦拭管壁，转移进超净台。
稀释离心去除冻存保护剂：无菌开启冻存管，细胞悬液缓慢滴入装有 4‑5mL 预热完全培养基的离心管，轻柔吹打混匀，1000r/min 离心 5min，沉降活细胞，弃去含 DMSO 的上清。
重悬接种：倒掉离心上清，加入 2mL 平滑肌细胞完全培养基，反复轻柔吹打管底沉淀，打散细胞团聚物，将细胞悬液转移至 T25 培养瓶，补加培养基，水平晃动培养瓶，使细胞均匀分布瓶底。
培养箱静置孵育：将培养瓶平稳放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，静置培养 24h，减少挪动，利于平滑肌细胞贴壁伸展。
换液观察状态：24h 后取出培养瓶，吸除旧培养基，无菌 PBS 轻柔冲洗细胞层，去除悬浮死细胞与碎片，更换预热新鲜完全培养基，放回培养箱，每日显微镜观察梭形细胞形态，观察是否存在污染。
传代处理：细胞汇合度达到 80‑85%，弃培养基，PBS 洗涤细胞 2 次，加入胰酶消化液，37℃消化 2‑4min，镜下细胞收缩变圆，加入完全培养基终止消化，吹打收集全部细胞悬液，离心，按比例分瓶传代培养。
