小鼠外周血单个核细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞（PBMC）即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。目前，主要的分离方法是密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异，因此得以分离出不同的细胞。
产品属性 product attributes
产品名称 小鼠外周血单个核细胞
简称 PBMCs;PBMC
组织来源 外周血
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
培养基： 小鼠外周血单个核细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 半贴壁半悬浮
细胞形态： 圆形
传代比例： 不传代
传代特性： 不建议传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠外周血单个核细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的小鼠外周血单个核细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的小鼠外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：取出小鼠外周血单个核细胞冻存管，37℃水浴快速摇晃融化冻存液，冻存液融化完毕，酒精消毒冻存管外壁，移入超净工作台。
稀释冻存悬液：无菌将冻存管细胞悬液转移至装有预热 RPMI‑1640 完全培养基的 15mL 离心管，轻柔吹打混匀，降低 DMSO 对免疫悬浮细胞的损伤。
离心收集细胞沉淀：离心管配平，1000r/min 离心 5min，离心结束，缓慢吸取弃除上清液，该细胞沉淀松散，操作防止细胞流失。
重悬悬浮细胞：加入外周血单个核细胞完全培养基，轻柔吹打沉淀，充分重悬，制备均匀悬浮细胞悬液，禁止剧烈吹打。
计数调整细胞浓度：取样台盼蓝染色计数活细胞，调整至实验需要的细胞浓度，接种悬浮培养瓶。
恒温悬浮孵育：放入 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱竖立静置孵育 24h，悬浮培养，不要平放培养瓶。
离心换液与后续实验：通过离心方式更换新鲜培养基，镜检细胞存活情况；细胞可用于分离亚群、淋巴细胞刺激增殖实验。
