小鼠胰腺导管上皮细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌生长抑素，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。成体胰腺导管上皮细胞作为胰腺前体细胞，已证实具多向分化潜能，在合适的外源性刺激下可分化成胰岛样细胞，胰腺导管上皮细胞转分化的胰岛样细胞免疫原性如何，转分化的胰岛样细胞在治疗糖尿病时是否发生免疫排斥反应，对干细胞临床治疗糖尿病具有重要意义。
产品属性 product attributes
产品名称 小鼠胰腺导管上皮细胞
组织来源 胰腺组织
默认种属 昆明小鼠，其他咨询
包被条件： 鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）
培养基： 小鼠胰腺导管上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 上皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠胰腺导管上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的小鼠胰腺导管上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的小鼠胰腺导管上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合密度梯度离心法、差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
无菌处死小鼠，乙醇消毒体表，开腹取出完整胰腺，预冷 PBS 反复冲洗胰腺组织，剔除附着脂肪、血管，尽量保留胰腺导管结构，转移至无菌培养皿。
无菌剪刀将胰腺剪为细小组织块，加入含 DNase I 的胶原酶 IV 消化液，37℃水浴消化 25‑30min，每隔 5min 轻柔颠倒混匀，直至组织松散，不出现大块硬结。
加入预热完全上皮培养基终止酶消化，移液管轻柔吹打组织，依次过 100μm、70μm 细胞筛，滤除大块胰腺腺泡组织，收集过滤后的细胞混合悬液。
悬液离心 1000r/min 5min，丢弃上清，PBS 重悬沉淀洗涤 2 次，去除消化酶、破碎细胞与红细胞，减少杂细胞干扰。
采用差速贴壁法初步去除成纤维细胞杂细胞，将细胞悬液置于培养瓶短暂孵育，成纤维细胞优先贴壁，收集未贴壁的导管上皮细胞悬液。
胰腺导管上皮专用完全培养基重悬细胞沉淀，计数并校准接种密度，接种于胶原包被的培养器皿，放入 37℃，5% CO₂培养箱静置孵育，减少挪动避免影响贴壁。
培养 24h 后镜检细胞贴壁情况，更换培养基清除悬浮死细胞；每 48h 换液，观察鹅卵石样上皮细胞形态，汇合度 70‑80% 进行传代，避免细胞过度增殖老化。
