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人钥孔虫戚血蓝蛋白酶联免疫试剂盒操作步骤

发布时间:2023-08-17      点击次数:193

      IgG人钥孔虫戚血蓝蛋白酶联免疫试剂盒试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中IgG表达。用纯化的IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中IgG相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的IgG抗体结合,形成抗体 抗原 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),与 CUTOFF 值相比较,从而判定标本中IgG的存在与否。

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人钥孔虫戚血蓝蛋白酶联免疫试剂盒操作步骤:


1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)


2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50%l。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40%l,然后再加待测样品 10%l。加样将样品加 于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,


3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。


4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用


5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。


6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50%l,空白孔除外。


7. 温育:操作同 3。


8. 洗涤:操作同 5。


9. 显色:每孔先加入显色剂 A50%l,再加入显色剂 B50%l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50%l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。


IgG人钥孔虫戚血蓝蛋白酶联免疫试剂盒

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