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A4

产品名称: A4
更新时间: 2021-12-28
产品型号:
产品特点: 本公司致力于建立并完善供货系统为广大科研单位提供免疫学,分子学,蛋白质表达纯化及检测,细胞学相关实验用品等。A4订购!

A4 的详细介绍

A4 具体操作
取出冻存管: 根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。
从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。
初学者易犯错误:水浴锅未预热或者未预热到37
水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。
离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。
一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。
实验前准备:将水浴锅预热至37
A475%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶 等。
迅速解冻:

迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化。
.-2min

冻存管内液体完全溶解,取出用酒精棉球擦拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。
平衡离心:用架盘天平平衡后,放入离心机中3000r/min 离心3min
制备细胞悬液:吸弃上清液。
向离心管内加入0ml培养液,吹打制成细胞悬液。
活化与细胞复苏    收到细胞株包裹时, 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形, 若有请立即通知。细胞株请尽速开始培养, 或立即冷冻保存置于70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)
 细胞复苏的原则-快速融化:必须将冻存在-96液氮中的细胞快速融化至37,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
细胞计数:细胞浓度以5×05/ml为宜。
培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入375CO2的培养箱内2-4小时或者24-48小时后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。
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