产品名称:伯氏疏螺旋体(BB)核酸检测试剂盒品牌
规格:48T/盒
类别:荧光-PCR法
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。
性能指标:点击了解更多荧光-PCR法。
1.试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。反式-4-基环己羧 2 ug pspT18 低温运输,-20℃保存
3-溴-5-氟三氟甲苯 2 ug pSRE-Luc 低温运输,-20℃保存
2-溴-6-硝苯酚 2 ug pST1347-cas9-D10A 低温运输,-20℃保存
(+/-)-四氢罂碱 2 ug pSTAT1-Luc 低温运输,-20℃保存
4-氯-3-硝基啶 2 ug pSTAT3-TA-Luc 低温运输,-20℃保存
3-氨基-5-基己 2 ug pSUMO 低温运输,-20℃保存
2-三氟基-D-丙氨 2 ug pSUOER-retro-neo 低温运输,-20℃保存
氢氧化镁 2 ug pSUOER-retro-neo/GFP 低温运输,-20℃保存
氧化镁 2 ug pSUOER-retro-puro 低温运输,-20℃保存
奎宁 2 ug pSUPER 低温运输,-20℃保存
氢氧化锂 2 ug pSUPER-basic 低温运输,-20℃保存
钼铵 2 ug pSUPER.puro 低温运输,-20℃保存
氢氧化钠 2 ug pSUPER-retro-neo 低温运输,-20℃保存
四氟硼三叔丁基膦 2 ug pSUPER-retro-puro 低温运输,-20℃保存
二氧化锰 2 ug pBAD His A 低温运输,-20℃保存
伯氏疏螺旋体(BB)核酸检测试剂盒品牌bFGF-4 大鼠碱性成纤维细胞生长因子4 CAS: 1235-82-1 规格: 200mg
bFGF-6 大鼠碱性成纤维细胞生长因子6 CAS: 603-50-9 规格: 125mg
Entamoeba histolytica Antigen 人痢疾内阿米巴抗原 CAS: 142-16-5 规格: 2ml
aFGF-1 大鼠性成纤维细胞生长因子1 CAS: 24939-16-0 规格: 30mg
Lyme IgG 人莱姆IgG CAS: 813-93-4 规格: 100mg
Campylobacter Jejuni PEB1 人空肠弯曲菌黏附蛋白 CAS: 1458327 规格: 1g
FASL 大鼠凋亡相关因子配体 CAS: 103597-45-1 规格: 200mg
CPAF(chlamydial protease-like activity factor) 人衣原体蛋白酶样活性因子 CAS: 3147-75-9 规格: 25mg
FAS/CD95 大鼠凋亡相关因子 CAS: 规格: 50mg
EPO 大鼠红细胞生成素 CAS: 104344-23-2 规格: 200mg
PV-IgG(Poliomyelitis Virus) 人脊髓灰质炎病毒IgG CAS: 规格: 200mg
EPOR 大鼠红细胞生成素受体 CAS: 84776-26-1 规格: 1.5g
T.gondii(Toxoplasma Gondii 人刚地弓形虫 CAS: 规格: 1g
Eotaxin 1/CCL11 大鼠嗜粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1 CAS: 规格: 20mg
anti-PIV IgG (Poliomyelitis Virus) 人抗副流感病毒IgG抗体 CAS: 10043-35-3 规格: 1g