产品名称:黄头杆状病毒PCR检测试剂盒价格
英文名称:YellowHead Baculovirus(YBV)RTPCR
规格:详见说明书
类别:PCR检测试剂盒
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。
性能指标:点击了解更多PCR检测试剂盒。
1.试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。2-基-5-氯嘧啶 38275-56-8 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
5-溴-2-基嘧啶 38275-57-9 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
米诺地尔 38304-91-5 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
丙二单甲酯钾盐 38330-80-2 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
2-羟基嘧啶盐盐 38353-09-2 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
2-溴-4'-(三氟基)苯乙酮 383-53-9 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
二氟乙乙酯 383-62-0 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
2-硝基三氟甲苯 384-22-5 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
1,2-二氢-2-异丁氧基喹啉-1-甲异丁酯 38428-14-7 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
3-甲氧基丙酯 713201 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
2-巯基烟 38521-46-9 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
4-基-5-羟基咪唑盐盐 38585-62-5 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
5-羟基噻唑 38585-74-9 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
(二甲氨基)乙缩二甲 38711-20-5 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
(3AR,4R,5R,6AS)-4-基六氢-2-氧代-2H-环戊并[B]呋喃-5-基 [1,1'-联苯]-4-甲酯 38754-71-1 5mL Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
黄头杆状病毒PCR检测试剂盒价格脂质体2000 规格: 0.1ml Rat LDL-IC
对二甲基亚苄基罗丹宁 规格: 0.1ml Rat hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α
罗丹宁 规格: 0.1ml rat Resistin
N-甲基吩甲基盐 规格: 0.1ml Rat Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg
草二乙酯 规格: 0.1ml Rat Factor-related Apoptosis,FAS
PUC18 规格: 0.1ml Rat Factor-related Apoptosis ligand,FASL
PUC19 规格: 0.2ml Rat apoptosis inducing factor,AIF
PUC19质粒 规格: 0.1ml Rat Azidothymidine,AZT
CNP-AFU底物 规格: 0.2ml Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR
规格: 0.1ml Rat telomerase,TE
五氧化二 规格: 0.1ml Rat dopamine,DA
汞 规格: 0.2ml Rat Dopamine D1 receptor,D1R
红色化汞 规格: 0.2ml Rat dopamine D2 receptor,D2R
五氧化二磷 规格: 0.1ml Rat dopamine transporter,DAT
三苯基氧化膦 规格: 0.1ml Rat catecholamine,CA