产品资料
首页 >>> 产品中心 >>> PCR检测试剂盒 >>> 荧光-PCR法 >>> 荧光-PCR法

荧光-PCR法

产品名称: 荧光-PCR法
更新时间: 2019-04-16
产品型号:
产品特点: 荧光-PCR法注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

荧光-PCR法 的详细介绍

性能指标:点击了解更多荧光-PCR法
1.试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月产品名称:荧光-PCR法
规格:48T/盒
类别:荧光-PCR法
运输:低温、避光、快递免费送货上门。
用途:生化实验,合成实验等试验。
运输及保存:低温运输,-20℃保存, 保存期限为 6 个月。
自备试剂:样品 RNA。

 

使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意:可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆转录)反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系(20 μL 体系)
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆转录酶(含 RI),
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用,丌需要纯化。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
2-基-3-硝苯甲酯 59382-59-1 400µL Bovine Serum Albumin, Acetylated -20℃保存

三基膦 594-09-2 100µg Vitronectin -20℃保存

3-氯-2-硝苯胺 59483-54-4 5mg Thioredoxin -20℃保存

DL-蛋氨 59-51-8 1mg Streptavidin -20℃保存

1-基吡唑-4-甲 5952-92-1 0.1mL Streptavidin,HRP conjugated 频繁使用时放4℃,长期不用时放-20℃

二基丙二 595-46-0 0.5mL Streptavidin,AP Conjugated 4℃保存,请勿冷冻

4-溴-2-甲氧苯胺 59557-91-4 10mg Avidin -20℃保存

3-氨基-2-萘甲 5959-52-4 2mg HRP-Avidin -20℃保存

2,2-二基-3-羟基丙 597-31-9 100mg AP-Avidin -20℃保存

2,2-二基丁二 597-43-3 5mg FITC-Avidin -20℃保存

2-甲乙酯苯胺 59777-72-9 1mg R-Phycoerythrin Avidin -20℃保存

2,5-二氯烟 59782-85-3 10mg Nuetral Avidin -20℃保存

代吗啉 1,1-二氧化物盐盐 59801-62-6 1g Biotin -20℃保存

1,1-环丙基二羧 598-10-7 5mg FITC-Biotin -20℃保存

溴丙 598-31-2 25mg Biotin-BSA -20℃保存
荧光-PCR法LM-137琼脂  规格: 1ml  Monkey apoprotein A1,apo-A1

改良缓冲蛋白胨水  规格: 0.2ml  Monkey apoprotein B100,apo-B100

枸橼盐培养基  规格: 0.2ml  Monkey Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF

Christensen尿素琼脂  规格: 0.1ml  Peanut agglutinin,PNA

尿素酶琼脂基础  规格: 0.2ml  Sophora japonica agglutinin,SJA

MR-VP培养基  规格: 0.2ml  Aflatoxin,AFT

缓冲葡萄糖蛋白胨水  规格: 0.1ml  Chicken 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu  

V-P半固体琼脂  规格: 0.1ml  Hydroxycorticosteroids,17-OHCS  

胰蛋白胨水  规格: 0.1ml  Chicken 17-ketosteroids,17-KS  

明胶培养基  规格: 0.1ml  Chicken 5-Nucleotidase,5-NT  

盐胨水培养基  规格: 0.2ml  Chicken factor B,BF  

靛基质试验培养基  规格: 0.2ml  Chicken C-Reactive Protein,CRP  

吲哚培养基  规格: 0.1ml  Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL  

丙二培养基  规格: 0.1ml  Chicken N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG  

马尿培养基  规格: 0.1ml  Chicken Interferon α,IFN-α
注意事项:
①加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

 

产品留言

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
上海谷研热门搜索:人ELISA试剂盒,羊ELISA试剂盒,仓鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒
Copyright@ 2018-2019 上海谷研实业有限公司 版权所有 地址:上海松江区莘砖公路1290号 邮编:201603
在线客服
电话
021-39921927
021-39596320
手机
18321818584
15026555973