常见问题:点击了解更多荧光-PCR法。
一.没有扩增产物
1.循环温度:变性温度、退火温度
2.引物设计
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA样品
二.非特异产物及电泳呈涂布状
1.Mg2 浓度
2.调整引物、模板、聚合酶的用量
3.适当减少循环数
4.适当提高退火温度,缩短退火或延伸时间
产品名称 | 丹毒杆菌(SER)核酸检测试剂盒供应商 |
规格 | 48T/盒 |
分类 | 荧光-PCR法 |
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。间氯苯 625-99-0 5g Cacodylic Acid Sodium Salt 室温干燥保存
间苯二甲 626-17-5 100g Calcium Chloride, Dihydrate 室温干燥保存
1,3,5-三溴苯 626-39-1 1mg Calcium Ionophore A23187 室温避光保存
2,4-二羟基-6-基嘧啶 626-48-2 100mL Canada Balsam 室温避光保存
3-基哌啶 626-56-2 10g CAPS 室温干燥保存
N-基哌啶 626-67-5 1g Carbenicillin Disodium Salt 4℃保存
L-高胱氨 626-72-2 25mg 6-Carboxyflucrescein Diacetate -20℃保存
己二单乙酯 626-86-8 25g Carboxymethylcellulose Sodium Salt 常温保存
1-(4-硝苯)哌 6269-89-2 1g Carmine 室温干燥避光保存
氯甲氯乙酯 627-11-2 100g Casein Acid Hydrolysate 室温干燥保存
3-溴-1-丙醇 627-18-9 100g Casein Enzymatic Hydrolysate 室温干燥保存
3-丙醇 627-32-7 50g Casein From Bovine Milk 室温干燥保存
N-基正丙胺 627-35-0 1g Catalase From Bovine Liver -20℃保存
3-氯丙胺盐盐 6276-54-6 5g Cefotaxime Sodium Salt 4℃保存
甲烷三羧三乙酯 6279-86-3 5g D-(+)-Cellobiose 室温保存
YNB培养基 规格: 0.1ml Bcl-2 associated X protein, Bax
标准方法琼脂 规格: 0.1ml BH3 interacting domain death agonist,Bid
咸蛋黄琼脂 规格: 0.2ml B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1
MEM培养基 规格: 1ml nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon,Nfkbie
DMEM培养基 规格: 0.1ml B cell differetiation factor,BCDF
F10培养基 规格: 0.1ml B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor,BAFF-R
F12培养基 规格: 0.1ml B-Cell Linker Protein,BLNK
199培养基 规格: 0.1ml B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2
1640培养基 规格: 0.1ml B-cell leukemia/lymphoma 3,Bcl3
1640培养液 规格: 0.2ml B cell growth protein,BCGF
Hanks平衡盐 规格: 0.1ml B cell receptor,BCR
IMDM培养基 规格: 0.1ml factor B,BF
高氏合成一号琼脂培养基 规格: 0.2ml C4 binding protein,C4BP
X-GAL琼脂培养基 规格: 0.1ml Cyclic AMP response element binding protein,CREB
XM-G琼脂培养基 规格: 0.1ml CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα
特点:
1. 丹毒杆菌(SER)核酸检测试剂盒供应商即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
用途:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。