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人γH2AX酶联免疫分析试剂盒

简要描述:人γH2AX酶联免疫分析试剂盒检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.

  • 产品型号:48T/96T
  • 厂商性质:
  • 更新时间:2023-10-24 00:00:00
  • 访  问  量:493

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详细介绍

产品名称:人γH2AX酶联免疫分析试剂盒
货号:GY-8524
包装:液体盒装(48T/96T)
贮藏:2—8°C,避光防潮保存。
有效期:6个月

试剂配制
、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):×20ml/瓶。
4、标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):×0ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):×0ml/瓶。
6、标记抗体(Biotin-antibody):×20μl/瓶(:00)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):×20μl/瓶(:00)
8、底物溶液(TMB Substrate):×0ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
0、终止液(Stop Solution):×0ml/瓶(2N H2SO4)。

试剂准备:
. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(8-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液mL,盖好后室温静置大约0分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入50μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

公司常年代理德国TSZ品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等ELISA试剂盒产品。


人γH2AX酶联免疫分析试剂盒检测中样品的处理
.细胞培养物上清:细胞培养物于室温000g,离心0分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。
2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,000g离心5分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
4.尿液:无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要保存尿样,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱保存。
5.组织匀浆:将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。注:取样和样品处理过程中,防止有毒物质对操作人员的危害,要采取相应的保护措施。
elisa酶联免疫试剂盒(间接法)
() 抗原包被:用包被液将PEDV抗原作∶5稀释包被反应板,每孔00μl,同时设阴性细胞培养物对照孔,置4℃过夜。
(2) 洗涤:用洗涤液洗涤2次,每次2min,沥干。
(3) 加入被检血清:用保温液将被检血清作∶00稀释,加入反应板相邻的两个孔中,每孔00μl。同时作阴、阳性标准血清对照,置37℃孵育h。
(4) 洗涤3次:方法同上。
(5) 加入酶结合物:用保温液将酶结合物作∶4 000稀释,加入反应孔中,每孔00μl,置37℃孵育h。
(6) 洗涤3次:方法同上。
(7) 加入底物:每孔00μl,置室温暗盒内显色20min。
(8) 加入终止液:每孔50μl,静置5min。
(9) 测定OD值:用检测仪,于492nm波长,按仪器使用及制定标准要求调节仪器,测定各反应孔的OD值,记录结果。

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注意事项:
.加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应5-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在5-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景0-5 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热5-30 min再进行测试。

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