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小鼠神经少突胶质前体细胞

简要描述:产品可保小鼠神经少突胶质前体细胞的生长状态。本产品中已包含小鼠神经少突胶质前体细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于小鼠神经少突胶质前体细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用,不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其它用途。

  • 产品型号:GOY-01X1396
  • 厂商性质:科研
  • 更新时间:2023-10-24 00:00:00
  • 访  问  量:187

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小鼠神经少突胶质前体细胞

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产品名称:小鼠神经少突胶质前体细胞

货号:GOY-01X1396

分类:原代细胞

2.组织来源:脑组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:小鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统,在银浸染标本中,少突胶质细胞比星状胶质细胞小,其突起也较小而少,呈珠状,故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。少突胶质细胞(oligodendrocyte)是中枢神经系统(CNS)的成髓鞘神经胶质细胞,其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是,细胞发育是一个连续的过程,其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限,因此,其分类是相对的。这三型分别为:Ⅰ型少突胶质细胞又称前O2Apre-O2A progenitor cell)。细胞呈圆形,表面光滑,直径约3μm,体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面,具有很强的分裂增殖潜力,表达GM1、波形蛋白和多唾液酸—神经粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion moleculePSA-NCAM)等。Ⅱ型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起,极少数为单极突起,直径约7μm,有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞,既可分化为少突胶质细胞又可分化为Ⅱ型星形胶质,故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cellO2A)。O2A除表达GM1和波形蛋白外还表达GD3GQ(淋巴杂交瘤株A2B5产生GQ的抗体),故常用A2B5抗体标记O2A。Ⅲ型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力,为分裂终期细胞。直径约10μm。根据其形成髓鞘的能力,又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的OL胞体常伸出45条较粗大突起,表面还残留有A2B5标记物,同时也表达O1-O4抗原,无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网,大量表达半乳糖脑苷脂(galactocerebro sideGC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid proteinPLP)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic proteinMBP)等,有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞(简称少突胶质细胞前体细胞)包括前O2AO2A和未成熟少突胶质细胞,前两者具有增殖能力。

5.方法简介:公司实验室分离的小鼠神经少突胶质细胞采用消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。

6.质量检测:公司实验室分离的小鼠神经少突胶质前体细胞经A2B5免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:包被条件 PLL0.1mg/ml) 培养基 含B-27 SupplementPDGFbFGFPenicillinStreptomycin等 换液频率 每2天半量换液1次 生长特性 贴壁 细胞形态 双极、多极形 传代特性 不传代,不增值,存活1-2周 培养条件 气相:空气,95%CO25%



培养操作

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小鼠神经少突胶质前体细胞1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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